Окружающими: Недопустимое название — Викисловарь

Содержание

Окружающие — это… Что такое Окружающие?

  • окружающие — см. соседние Словарь синонимов русского языка. Практический справочник. М.: Русский язык. З. Е. Александрова. 2011. окружающие сущ., кол во синонимов: 3 • …   Словарь синонимов

  • окружающие — см. окружающий; их; мн. Помощь, уважение, любовь, доброта окружающих. Окружающие верят в него. Зависеть, скрыть от окружающих. Поддерживать связь с окружающими. Рассчитывать на окружающих …   Словарь многих выражений

  • окружающие атмосферные условия — — [А.С.Гольдберг. Англо русский энергетический словарь. 2006 г.] Тематики энергетика в целом EN atmospheric environment …   Справочник технического переводчика

  • окружающие породы, вмещающие породы — — [http://slovarionline.ru/anglo russkiy slovar neftegazovoy promyishlennosti/] Тематики нефтегазовая промышленность EN environment …   Справочник технического переводчика

  • окружающие условия

    — — [А.С.Гольдберг. Англо русский энергетический словарь. 2006 г.] Тематики энергетика в целом EN medium …   Справочник технического переводчика

  • окружающие условия — aplinkos sąlygos statusas T sritis fizika atitikmenys: angl. ambient conditions; environmental conditions vok. Umgebungsbedingungen, f; Umweltbedingungen, f rus. внешние условия, n; окружающие условия, n; условия окружающей среды, n pranc.… …   Fizikos terminų žodynas

  • окружающие — 1. окружающие, окружающих, окружающим, окружающие, окружающими, окружающих 2. окружающие, окружающих, окружающим, окружающих, окружающими, окружающих (Источник: «Полная акцентуированная парадигма по А. А. Зализняку») …   Формы слов

  • Мышцы, окружающие ротовую щель — Мышцы, окружающие ротовую щель, делятся на две группы. Одну группу представляет круговая мышца рта, m. orbicularis oris, сокращение которой суживает ротовую щель. В другую группу входят мышцы, располагающиеся радиально по отношению к ротовой… …   Атлас анатомии человека

  • нормальные окружающие условия — обычные условия эксплуатации — [Л.Г.Суменко. Англо русский словарь по информационным технологиям. М.: ГП ЦНИИС, 2003.] Тематики информационные технологии в целом Синонимы обычные условия эксплуатации EN standard environment …   Справочник технического переводчика

  • элементы, окружающие зону проведения соревнований

    — территория, прилегающая к зоне проведения соревнований Все пространство вокруг зоны проведения соревнований и смешанные зоны на соревновательных объектах. Зона проведения соревнований и прилегающая к ней территория – это, пожалуй, наиболее… …   Справочник технического переводчика

  • ОКРУЖАЮЩИЙ — это… Что такое ОКРУЖАЮЩИЙ?

  • окружающий — внешний Окружающий со всех сторон, находящийся в ближайшей окрестности. [http://www.oceanographers.ru/index.php?option=com glossary&Itemid=238] Тематики океанология Синонимы внешний EN ambient …   Справочник технического переводчика

  • ОКРУЖАЮЩИЙ — ОКРУЖАЮЩИЙ, ая, ее. 1. Находящийся вокруг кого чего н.; составляющий чью н. среду. Окружающая местность. Окружающая обстановка. Окружающие люди. 2. окружающее, его, ср. То, что окружает, среда, обстановка. Тяготиться окружающим. 3. окружающие, их …   Толковый словарь Ожегова

  • окружающий — прил., кол во синонимов: 24 • берущий в кольцо (4) • обводящий (17) • обжимающий (10) …   Словарь синонимов

  • окружающий со всех сторон — прил., кол во синонимов: 1 • обкладной (1) Словарь синонимов ASIS. В.Н. Тришин. 2013 …   Словарь синонимов

  • Окружающий табачный дым — табачный дым, содержащийся в атмосферном воздухе закрытых помещений, в которых осуществляется курение табака… Источник: Федеральный закон от 10.07.2001 N 87 ФЗ (ред. от 22.12.2008) Об ограничении курения табака …   Официальная терминология

  • окружающий мир — сущ., кол во синонимов: 3 • бытие (10) • действительность (25) • существенность (31) …   Словарь синонимов

  • окружающий воздух — — [А.С.Гольдберг. Англо русский энергетический словарь. 2006 г.] Тематики энергетика в целом EN ambient airenvironmental air …   Справочник технического переводчика

  • окружающий воздух — 3.1.1 окружающий воздух (ambient air): Атмосферный воздух в непосредственной близости от газоанализатора. Источник …   Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации

  • окружающий мир — ▲ мир (чего) ↑ обитание окружающий мир. мир совокупность, система всего существующего. свет. белый свет (чего только нет на белом свете). божий свет. ↓ сознание …   Идеографический словарь русского языка

  • окружающий шум — aplinkos triukšmas statusas T sritis fizika atitikmenys: angl. ambient noise vok. Umgebungsgeräusch, n rus. окружающий шум, m; шум окружающей среды, m pranc. bruit d’ambiance, m …   Fizikos terminų žodynas

  • Как подружиться с окружающими, если вы скромный интроверт

    1. Будьте собой

    Интроверты нуждаются в одиночестве, и отказываться от него не стоит. Это нормально, если вы не хотите всё время проводить среди других людей. Поэтому, прежде чем искать новых друзей, спросите себя, действительно ли вам это необходимо? Может, вы просто считаете, что у вас должно быть больше знакомых — как у всех? А может, вам навязали эту точку зрения?

    Но если вы и правда хотите расширить свой круг общения, в первую очередь определите, каких людей вы хотите видеть рядом с собой. Обычно комфортнее всего бывает с теми, кто разделяет ваши интересы и взгляды на жизнь.

    Поэтому стоит сосредоточиться на том, что увлекает вас, отыскать людей со схожими хобби и дать новым знакомым узнать себя поближе, полюбить за то, кто вы есть на самом деле.

    2. Меняйте не себя, а своё поведение

    Черты личности изменить нелегко, но можно попробовать иногда вести себя иначе. Психологи выяснили, что более экстравертное поведение может положительно влиять на самочувствие человека.

    Попробуйте перекинуться парой слов с коллегой на офисной кухне, принять приглашение на вечеринку, оставить комментарий в сообществе в социальной сети. Отслеживайте, что вы чувствуете, когда делаете непривычные вещи. Если вам некомфортно, не заставляйте себя.

    3. Не бойтесь, что люди сразу вас не полюбят

    Мы часто стараемся произвести хорошее первое впечатление на людей, боимся их разочаровать и думаем, что нас могут невзлюбить. Но беспокоиться об этом не надо. Специалисты из разных университетов США доказали, что после знакомства вы нравитесь людям намного больше, чем думаете.

    4. Здоровайтесь с людьми первыми

    Совет может показаться банальным, но скромные интроверты зачастую стесняются сказать «привет» или посмотреть человеку в глаза. А ведь именно эти простые действия показывают людям, что вы дружелюбны. Поэтому не бойтесь первым помахать кому‑то рукой и улыбнуться.

    5. Используйте дружелюбный язык тела

    Чтобы обрести уверенность в себе и улучшить взаимодействие с людьми, старайтесь показывать телом свою открытость к общению, советует Ванесса Ван Эдвардс — писатель, основатель лаборатории The Science of People, исследующей поведение людей.

    Не скрещивайте руки на груди, будто бы защищаясь, держите спину прямо. Улыбайтесь и кивайте, поддерживая собеседника и побуждая его продолжать рассказ.

    6. Дайте себе время

    Мы показываем себя настоящих, только когда чувствуем себя комфортно с кем‑то. Но для этого нужно время. И если вам поначалу неудобно находиться с новыми друзьями, не ругайте себя, говорит писатель Дженн Граннеман. Чем больше вы будете проводить с ними время, тем комфортнее вам будет.

    7. Интересуйтесь людьми, задавайте вопросы

    Когда мы встречаем новых людей, приходится говорить о себе, а этого боится каждый интроверт. Но разговор не обязательно должен быть о вас.

    Дженн Граннеман

    автор книги «Секретная жизнь интровертов. Искусство выживания в «громком» мире экстравертов»

    У интровертов есть суперсила: слушать. Так что заставьте собеседника говорить, задавая ему вопросы.

    Люди любят рассказывать о себе и о том, что они думают. Дайте им такую возможность и иногда отвечайте на их вопросы.

    8. Используйте свои сильные стороны

    Другим людям могут нравиться ваши черты характера, особенности поведения, навыки. Пользуйтесь этим.

    Изучите себя, выясните, в чём вы хороши. Например, вы можете быть прекрасным слушателем, сострадательным и чутким человеком, а ваши друзья могут рассчитывать на вашу поддержку и умение хранить тайны.

    Ваши уникальные качества могут понравиться другому интроверту, который признает в вас близкого по духу человека, или смогут дополнить противоположные черты экстраверта.

    9. Не бойтесь пробовать новое

    Если ваши нынешние увлечения не помогают вам расширить круг общения, поищите новые хобби. Начать можно с того, что всегда интересовало: записаться в танцевальный класс или на экскурсию по родному городу, поработать волонтёром или поучаствовать в общественных мероприятиях.

    Не нужно ни с кем разговаривать в первый раз, если вам некомфортно. Но если вам понравится, вы можете продолжать ходить на мероприятия и поддерживать отношения с кем‑то, кого уже встречали там.

    Зачастую нас тянет к людям со схожими ценностями и опытом, но не бойтесь знакомиться с людьми, которые отличаются от вас. Общение с ними поможет расширить ваш кругозор или даже поменять взгляд на мир.

    10. Присмотритесь к уже знакомым людям

    Вам не обязательно искать друзей среди незнакомцев. Автор книг об интровертах София Демблинг предлагает обратить внимание на окружающих: кто‑то из них может оказаться интересным человеком со схожими увлечениями и взглядами на жизнь.

    Может быть, ваш коллега любит ту же музыку, что и вы, и с радостью составит вам компанию на концерте. Или он читает так же много и готов поделиться своей коллекцией интересных книг. А может, ваша бывшая одноклассница на самом деле интересная девушка, с которой можно поговорить обо всём на свете? Присматривайтесь к людям!

    11. Будьте чуть настойчивее

    Если хотите с кем‑то подружиться, не бойтесь рискнуть и сделать первый шаг, написать, завести разговор.

    София Демблинг

    автор книг об интровертах

    То, что вам кажется навязчивым, может показаться другим дружелюбным. Наша чувствительность может работать на нас или против нас. Не будьте настолько чувствительны, чтобы бояться рискнуть. Будьте достаточно чуткими, чтобы понять, стоит ли отойти в сторону.

    И не бойтесь неловкости в общении, если она возникнет в первое время. Это никак не характеризует вас или другого человека. Просто так бывает в начале дружбы.

    12. Не гонитесь за количеством

    Психологи считают, что на самом деле не важно, сколько у вас друзей. Важно, насколько они подходят именно вам. Потому что качество отношений с людьми напрямую влияет на чувство счастья и удовлетворённость жизнью.

    Возможно, вам достаточно иметь крепкие отношения с семьёй и одним другом, ладить со своими коллегами и при необходимости поддерживать вежливый разговор. И если вам так комфортно — хорошо. В конце концов, лучше иметь одного, но хорошего друга, чем собрать толпу знакомых, на которых у вас нет ни времени, ни энергии.

    13. Тренируйтесь в общении, но не переусердствуйте

    Чтобы улучшить свою способность взаимодействовать с другими людьми, общайтесь с ними. Однако не нужно быть социально активным постоянно. Не проводите слишком много времени с друзьями, если это вызывает у вас стресс.

    14. Погрузитесь в рутину дружбы

    Многие интроверты любят рутину, так что не бойтесь просить друзей о встрече раз в неделю в определённое время. Например, чтобы пообедать в субботу в вашем любимом ресторане или прогуляться в парке во вторник после работы.

    Дженн Граннеман

    автор книги «Секретная жизнь интровертов. Искусство выживания в „громком“ мире экстравертов»

    Когда мы знаем, чего ожидать, то чувствуем себя более комфортно и тратим меньше энергии. Кроме того, так вам не нужно будет придумывать что‑то новое и интересное каждый раз, когда вы собираетесь вместе.

    15. Не расстраивайтесь, если дружбы не вышло

    Бывает и такое, что некоторые отношения просто не складываются, и это нормально. София Демблинг уверяет: когда дружба терпит неудачу, проигравших нет. Поэтому откажитесь от самобичевания и продолжите поиски своего человека.

    Читайте также 🧐

    ГДЗ по окружающему миру 2 класс Рабочая тетрадь Плешаков Решебник

    Наш учебно-методический комплекс даст ответы на любые упражнения, поможет подготовиться к уроку. В этом пособии собраны все необходимые данные, которые дают возможность безошибочно проработать домашнее задание.

    Когда понадобится решебник по окружающему миру за 2 класс Плешаков рабочая тетрадь

    На уроках этой дисциплины дети научатся измерять температуру воздуха, определять связь между живой и неживой природой, узнают важные правила этикета. Ребятам в рабочей тетради предлагается выполнить упражнения:

    • проанализировать ситуацию;
    • найти фотографии или иллюстрации к определенному рассказу;
    • сочинить свою историю;
    • с помощью учебника дописать определение понятий;
    • подчеркнуть слова определенным цветным карандашом;
    • выделить лишнее слово и объяснить выбор.

    Дети получат знания из таких наук, как астрономия, экология, биология, физика, география. Несмотря на кажущуюся простоту заданий для взрослых, дети могут испытывать трудности при прохождении практики. Ведь они только учатся и многого не знают. Чтобы каждый раз на помощь не звать взрослых, ребенок может воспользоваться сборником с ответами. Книга соответствует ФГОС, она помогает развить метапредметные, предметные и личностные универсальные учебные действия.

    Особенности онлайн-ресурса по окружающему миру для 2 класса к тетради автор: А. А. Плешаков

    Чтобы не пропал интерес к предмету, необходимо школьника постоянно поддерживать. Но что делать, когда у мамы или папы совершенно не хватает времени? На помощь придет решебник. Второклассники неплохо справляются с мобильными устройствами. Поэтому работа с этим сайтом для них не будет новой. К тому же этот онлайн-ресурс сэкономит время малыша на поиске информации. Сайт содержит обе части рабочей тетради, а навигация осуществляется по номеру страницы. Интерфейс очень простой и не отвлекающий. Ученик легко и быстро сможет выполнить домашнее задание. На сайте даны только верные ответы, а также подробные объяснения от авторов. Иллюстрации помогают наглядно донести любой материал. Выполненные практические задания подскажут как оформить ход решения. С этим сборником учащийся самостоятельно справится с любыми трудностями.

    Какие результаты ждут школьников

    Данный онлайн-ресурс пригодится родителям, которые следят за успеваемостью малыша. Они смогут проверить домашнюю работу, не вникая в суть задачи. С помощью этой онлайн-шпаргалки второклассник научится:

    • оценивать свои знания;
    • заранее готовиться к уроку;
    • составлять конспекты;
    • подбирать информацию;
    • работать над ошибками.

    Пособие можно открыть в любое удобное время как на уроке, так и дома. Пособие поможет вовремя устранить пробелы в знаниях и не даст отстать от сверстников.

    Как общаться с окружающими и с миром • Объединение

    С самого начала хочется просто всех обнять и поддержать. Теперь к делу: в случае возникновения любой ситуации правила хорошего тона и грамотности никто не отменял. Я совсем не уверена, что этим текстом привнесу что-то новое, но хочу поделиться личным опытом.

    1.

    Следите за своим состоянием и не принимайте решений на горячую голову. У каждого свои способы наладить внутреннее равновесие.

    «В любой непонятной ситуации лучше всего глубоко вдохнуть и выдохнуть. Повторяйте это упражнение, пока не стабилизируетесь. Если не можете стабилизироваться, то никому ничего не пишите. Я обычно встаю и выхожу на улицу, иногда иду в офисный бар за стаканом воды или чаем. Кстати, еще можно зайти в переговорку и просто на выходе громко крикнуть. Сначала я предупреждала коллег о крике, но сейчас они уже привыкли».

    2.

    Если у вас есть команда, вам очень повезло. Поддержите друг друга и не стесняйтесь просить поддержки в том числе и в работе.

    «Сейчас все в похожей ситуации. Если не напрямую, то косвенно. Помните об этом. И помните, что люди реагируют по-разному: от проявлений паники и глубокой подавленности до приступов агрессии. Все эти состояния не связаны лично с вами (надеюсь) — это различные механизмы защиты. Если вы в силах поддержать кого-то — делайте это. Если не в силах, то найдите того, кто вам поможет.

    Готовите комментарий или пост — попросите кого-то посмотреть на него свежим взглядом. Лучше, если это будет редактор, но при отсутствии оного, обсудите с коллегами, которые сейчас в более спокойном состоянии, чем вы. Лучше потратить время на точность формулировок, чем потом отвечать на большое количество комментариев и писем.

    Свою команду я всегда призываю смотреть тексты или письма рассылок друг за другом, работать сообща над некоторыми проектами, обсуждать план и объём сотрудничества. В случае, если вы не пришли к одному ответу в команде (предложение начальника не всегда единственно верное), то мы идем к третьей стороне — редакторам, smm-щикам, департаменту по работе с аудиторией. Попросить совет или помощь — не стыдно».

    3.

    Обращайте внимания на формулировки. На каждое слово. Помните — вы за них отвечаете.

    «Даже в такой эмоционально нестабильной ситуации, пожалуйста, помните о своем профессионализме и деловой репутации. Всякий раз, когда вы выступаете публично от себя или от имени работодателя в социальных сетях, или рассылке по медиа, готовьтесь к реакции и оценке вашего высказывания или высказывания вашего работодателя. Специалист, работающий в коммуникациях, отвечает за это головой. В частном разговоре — на кухне или в баре с друзьями — старайтесь помнить о ценности принципа «не навреди» ни себе, ни работодателю.

    При этом помните, что в результате даже самой высококлассной коммуникации вы можете столкнуться с неадекватной реакцией. Переврут все данные, перепишут ваш комментарий до неузнаваемости. Это бывает. Вдыхайте, выдыхайте, пишите и дозванивайтесь, чтобы это исправить. Не грубите и не ругайтесь. Ваша работа — исправить неточность».

    4.

    Как сегодня правильно начать письмо?

    «Так, как вам комфортно. Но и относитесь с пониманием к тому, что комфортно другим. Если вам тяжело по разным причинам писать «Добрый день!», то замените его на нейтральное «Здравствуйте». Если вы хорошо знаете журналиста/подрядчика/партнеров, и ваш стиль общения это позволяет, то можно заменить на «Привет». Это работает и в обратную сторону. Не корите тех, кто продолжает писать про добрые дни. Это устойчивое выражение, принятое в обиходе».

    5.

    Информационное поле сейчас переполнено эмоциями, и это совершенно понятно. Старайтесь быть полезными своей аудитории: информируйте о том, как работает ваш проект, что у вас происходит.

    «Если вы не прекращаете работу в социальных сетях или на сайте вашего проекта, то сейчас наиболее уместным выглядит информационная коммуникация — факты о событиях, часах работы, исторические справки, тематические подборки без эмоциональной окраски. Эта информация должна быть полезна вашим посетителям/клиентам. Об этом хорошо написал Саша Сысоев в своем канале».

    6.

    Как отвечать на сложные вопросы?

    «Вам продолжат приходить запросы на комментарии по тем или иным вопросам. Поймите тех, кто на фоне происходящих событий запрашивает мнение на потерявшие для вас актуальность темы. Есть люди с редакционными заданиями, которым нужно выполнять свою работу. Если вы не можете дать комментарий, то озвучьте вашу позицию и адекватную причину: пока у вас нет такой информации / вы ещё не готовы высказать однозначную позицию / это не ваша тема / вы планируете в ближайшие дни отказаться от комментариев.

    Очевидно, что сейчас почти все компании и институции пересматривают сотрудничества, инвестиции, бюджеты и прочее. Если вы прекращаете сотрудничество, то постарайтесь очень чётко прописать фактическую причину: нет контента, проект принято решение завершить, проект переносится на неопределенный срок, прочее. Обязательно спросите, какие от вас нужны документы, и как помочь в скорейшем разрешении документооборота».

    7.

    Как сегодня относиться к дедлайнам?

    «Сейчас большой поток информации и многие компании переформатировали свою работу. Особенно это касается медиа. Если ваш вопрос срочный, постарайтесь заранее подготовить к этому другую сторону. Если вы пиарщик, и у вас важная (действительно важная) новость — предупредите медиа заранее. Если вам не отвечают сразу же, то дайте время. Напомните о себе, но если ответа нет — значит, нет.

    Если от вас требуют комментарий в формате «немедленно», то просто оцените, насколько это реалистично, и обозначьте время, когда вы вернетесь, — если не с комментарием, то с ответом».

    Семейный круг. Сложности отношения к себе и взаимодействия с окружающими людьми.

    Внутренние переживания человека, реакции человека на все внешние события человеческой жизни обусловлены, прежде всего, особенностями его личности.

    Личность – это открытая внешним воздействиям саморегулирующаяся динамическая система взаимосвязанных и взаимовлияющих подструктур: сила и направленность мотиваций, тип эмоционального реагирования, интеллект, стиль межличностного реагирования (Собчик Л.Н., 1990).

    В структуру личности (комплекс устойчивых признаков) входят: темперамент, чувствительность, способности, установки, нравственность, мотивация, ход мыслей и, конечно, поведение.

    К признакам здоровой личности (Г.К. Ушаков) относятся:
    — активная позиция по отношению к реальности;
    —способность видеть события жизни такими, как есть;
    —самопознание;
    —способность к абстракции;
    —постоянный процесс индивидуализации;
    —устойчивость к фрустрациям.

    Таким образом, личность является сложной структурой, которая во многом определяет жизнь человека, существенно влияет на наше взаимодействие с окружающем миром и определяет наравне с физическим здоровьем качество нашей жизни.

    Очень важным, можно сказать главным компонентом личности человека является его характер.

    В психологии под характером понимается совокупность свойств личности, определяющих наиболее существенные аспекты социального поведения человека. Именно в этом смысле говорят, что у человека плохой или хороший, благородный или подлый, высокий или низкий характер. Эти свойства являются постоянными для данного человека, и поэтому, зная их, можно заранее прогнозировать его поступки в конкретных ситуациях.

    От сбалансированности разных черт характера и зависит отношение к себе и взаимодействие с окружающими. Этот баланс и определяет характеристику характера (личности), выделяют полностью сбалансированный характер, т.е. гармоничный, акцентуированный характер и аномальную личность.

    Гармоничная личность – особый тип личности, характеризующийся сбалансированным внутренним состоянием и возможностью выстраивать оптимальные взаимоотношения с окружающим миром. Гармоничной личности присуще душевное спокойствие, умением ладить с людьми и, хорошая приспособляемость к очень многим жизненным ситуациям.

    При этом считать гармоничную личность эталоном, идеалом для всех не стоит. Такая личность удобна прежде всего сама для себя. Например, гармоничный человек в профессиональной деятельности выбирает способ деятельности, оптимальный лично для него, не считая себя обязанным работать в режиме, нужном для дела, когда этот режим будет его излишне напрягать.

    Также и в личной жизни, гармоничная личность не готова платить излишним для нее внутренним напряжением и ради высоких целей: свое спокойствие и гармония такому человеку дороже. Поработал — отдохнул, пообщался — уединился, всего понемногу для себя и других, для здоровья, радости и развития. Быть героем, работать на пределе сил, совершать подвиги, посвящать себя одной великой цели – все это не нужно и неинтересно гармоничной личности.

    У многих людей заострены (усилены) или наоборот слабо выражены или отсутствуют отдельные черты характера, в таких случаях говорят об акцентуации характера, что является крайнем вариантом нормы.

    Акцентуации характера (Личко А.Е., 1977)
    или акцентуированные личности (Leonhard K., 1968) – это крайние варианты нормы, при которых отдельные черты характера чрезмерно усилены, вследствие чего обнаруживается избирательная уязвимость в отношении определенного рода психогенных воздействий при хорошей и даже повышенной устойчивости к другим.

    На формирование акцентуации характера влияют определенные наследственные предпосылки, особенности социальной среды, в том числе семья, в которой находится человек длительное время и тип воспитания.

    Разные специалисты выделяют определенные типы характеров (акцентуаций). У каждой из них есть сильные и слабые стороны и главное, каждая личность дает реакцию в определенных ситуациях (уязвимость личности).

    Каждому типу акцентуации характера присущи свои, отличные от других типов «слабые места», у каждого типа своя ахиллесова пята.

    Акцентуации характера – это крайние варианты его нормы, при которых отдельные черты характера чрезмерно усилены, отчего обнаруживается избирательная уязвимость в отношении определенного рода психогенных воздействий при хорошей и даже повышенной устойчивости к другим.

    Следует еще раз подчеркнуть, что акцентуации характера представляют собой хотя и крайние, но варианты нормы. Поэтому «акцентуация характера» не может быть психиатрическим диагнозом. По мнению К. Leonhard (1976, 1981), в развитых странах более половины популяции относится к акцентуированным личностям (Личко А.Е., 1983)

    Расстройства личности (personality disorders) – это группа патологических состояний вследствие нарушения процесса формирования личности и характеризующиеся дисгармонией свойств личности, преимущественно эмоционально-волевых при наличии достаточного уровня развития интеллекта.

    Основными клиническими признаками расстройств личности являются выраженность и стойкость определенных черт характера и повторяющиеся периоды социальной декомпенсации (социальные ситуации, вызывающие серьезные трудности и проблемы). Эти характеристики (клинические признаки) очень важны для понимания проблемы, поэтому требуют пояснений.

    Выраженность определенных черт характера (психиатры обозначают это термином – тотальность) – это такое существенное заострение конкретных черт характера, что оно влияет на всю психическую жизнь человека, определяет все его поведение, мысли и поступки. Во всех жизненных ситуациях этот определенный тип характера проявляется в семье, в учебном заведении, на работе, на отдыхе. Проявляется эти заостренные особенности характера как в обычных, стандартных, так и чрезвычайных ситуациях.

    Стойкость обозначает, что на протяжении всей жизни характер данного человека практически остается неизменным.

    Социальная декомпенсация – это периоды жизни (социальные ситуации), в которых этим людям их характер мешает приспособиться к той или иной ситуации и у них возникают затяжные трудности, проблемы, конфликты, существенно влияющие на их жизнь в худшую сторону.

    Расстройства (аномалии) личности выявляется у 5% взрослого населения. Выделяют конституциональные (врожденные), органические и приобретенные (патохарактерологическое развитие личности) аномалии характера.

    В формировании врожденных, конституциональных расстройств личности, ведущую роль в их формировании играет наследственный фактор (наследование темперамента, особенностей влечений и психомоторики).

    При органических аномалиях характера главный фактор – негрубые экзогенно-органические повреждения головного мозга (инфекции, травмы, интоксикации, гипоксия, иммунологическая несовместимость и другие факторы во внутриутробном и раннем периодах развития).

    Патохарактерологическое развитие – это патологическое формирование личности, связанное с хронической психотравмирующей ситуацией в микросреде и/или неправильным воспитанием (Кербиков О.В.,1971).

    Причинами формирования патохарактерологического развития личности являются психотравмирующие воздействия тяжелых жизненных обстоятельств и ситуаций (тяжелая болезнь, потеря значимого человек и т.п.) и прямое стимулирование неправильным воспитанием тех или иных нежелательных черт характера (возбудимость, агрессивность слабость выдержки, робость и т. п.).

    Если вам тяжело общаться, вы часто испытываете негативные эмоции без существенных внешних причин, вступаете в конфликты несмотря на то, что это наносит ущерб прежде всего вам – приходите! Наши специалисты помогут вам научиться управлять собой, правильно оценивать различные ситуации и поступать согласно необходимости.

    ГДЗ по Окружающему миру 3 класс Плешаков часть 1, 2

    Авторы: А.А. Плешаков, Е. А. Крючкова.

    Окружающий мир — это предмет, с помощью которого школьники получают первоначальные знания о природе, физических и химических процессах, экологических и биологических явлениях. Учебники по природоведению издаются многими авторами, и одним из них является А.А.Плешаков. Методист разработал несколько учебных пособий, в том числе и для третьего класса. Вместе с основной книгой идёт и вспомогательный решебник, с помощью которого ребенок сможет проверить правильность выполнения заданий.

    С какими разделами может помочь сборник ГДЗ?

    Пособие для 3 класса окружающий мир (автор: А.А. Плешаков) с готовыми домашними работами позволит разобраться в вопросах, связанных со следующими темами:

    • человек и природа;
    • тела, вещества, частицы;
    • экология;
    • воздух, круговорот воды;
    • растения, животные и грибы;
    • человеческий организм, здоровье, питание и др.

    В конце каждой из тематик учащийся должен ответить на несколько вопросов и выполнить некоторые задания.

    Чем и кому может помочь решебник?

    Сборник призван оказать содействие в решении упражнений и нахождении верных ответов. Используя его, третьеклассник способен:

    • без лишней траты времени эффективно подготовиться к следующим урокам по дисциплине;
    • разобрать неясные моменты, темы и аспекты;
    • совершить самопроверку;
    • закрепить материал, полученный на классном занятии.

    Подготовка д/з с применением данного ресурса станет для ребенка приятным времяпровождением. Сэкономленное время позволит ему уделять больше внимания кружкам, секциям, хобби и другим полезным видам деятельности.

    ГДЗ для 3 класса под редакцией Плешакова А.А. также могут использовать родители с учителями. Для первых это станет подспорьем в деле контроля успеваемости и знаний своих детей. Ознакомившись с материалами, взрослые будут готовы мгновенно прийти на помощь в случае возникновения у школьника определённых проблем. К тому же им всегда будет приятно повторить некоторые моменты из школьной программы и возможно узнать что-то новое. Преподаватели природоведения же смогут использовать готовые ответы с целью продумывания урочных планов, а также формирования собственных методических материалов для диагностики учащихся.

    26 синонимов ОКРЕСТНОСТИ — Merriam-Webster

    Тезаурус

    обстоятельства, условия или объекты, которыми человек окружен
    • мы расслабились и ненадолго забыли о своих заботах в роскошной обстановке отеля

    Синонимы к слову окружение

    • окружающая среда,
    • атмосфера,
    • климат,
    • климат,
    • контекст,
    • контекст,
    • окружающая среда,
    • окрестности,
    • средний,
    • среда,
    • мизансцена,
    • настройка,
    • объемный,
    • местность

    слов, связанных с окрестностями

    См. определение в словаре

    определение окружающего в The Free Dictionary

    Он принял меры предосторожности, окружив дворец густым облаком, а затем поспешил ко двору, где его длительное отсутствие вызывало много беспокойства.Нукухева — самый важный из этих островов, единственный, у которого корабли имеют обыкновение соприкасаться, и известен как место, где предприимчивый капитан Портер переоборудовал свои корабли во время недавней войны между Англией и Соединенными Штатами. и откуда он совершил вылазку на большую китобойную флотилию, плававшую тогда под вражеским флагом в окрестных морях. Некоторых он отправил в различные другие части территории, окружающей бунгало. По этой дороге я поднялся на значительную высоту и получил хороший обзор. из окрестных лесов.Когда, как это обычно бывало, мне не с кем было общаться, я поднимал эхо, ударяя веслом о борт лодки, наполняя окрестные леса кружащимся и расширяющимся звуком, возбуждая их, как хранитель зверинец его диких зверей, пока я не вызвал рычание из каждой лесистой долины и склона холма. Действительно, пренебречь окружением города стеной было бы подобно выбору страны, которая легко доступна для врага, или сравнять с землей ее возвышенности; или как будто человек не должен иметь стены в своем доме, чтобы не подумали, что владелец ее был трусом; и это не должно быть оставлено без внимания, чтобы те, у кого город окружен стенами, могли действовать в обоих направлениях, либо как если бы это было или как если бы это не было; но там, где его нет, они не могут этого сделать.В полой груди гор, в которую они теперь проникали, окружающие высоты были одеты соснами; в то время как склоны нижних холмов давали лошадям обилие травы. или любое другое расстройство; и задействовано как можно меньше рук. И вот большая колесница наконец подъехала к высокой стене, окружавшей Город, и остановилась перед великолепными, усыпанными драгоценностями воротами.Подобные памятники переходов и борьбы человека до сих пор часто встречаются на протяжении широкой преграды дикой природы, которая когда-то разделяла враждебные провинции, и образуют своего рода руины, которые тесно связаны с воспоминаниями о колониальной истории и которые должным образом согласуются с мрачный характер окружающего пейзажа. То, что они должны платить ценой одной жизни за каждую попытку забрать его, оказало на них свое влияние, и теперь они больше не начинали новый рывок, и когда они это делали, это было организовано более искусно, чем те, которые предшествовали этому, потому что они разделились на три группы, которые, частично окружив его, шли одновременно к нему с разных сторон, и хотя он хорошо разрядил свой пистолет, они наконец достигли его.Во-первых, виноват в том, что я умнее любого из окружающих меня людей.

    Окружающие определение и значение | Британский словарь

    окружающий /səˈraʊndɪŋ/ имя прилагательное

    окружающий

    /səˈraʊndɪŋ/

    прилагательное

    Британский словарь определение ОКРУЖАЮЩИЙ

    всегда используется перед существительным

    : рядом или вокруг кого-то или чего-то

    Flos Lighting, Artemide, Contemporary Lighting, Jielde, Oluce, LucePlan, Noguchi Lamps, Kartell, Viso, Penta Light, Lumina, Serralunga, Fontana Arte: окружающий.ком

    DesignerAchille CastiglioniAlberto MedaAlfredo HaberliAndrea BranziAntonio CitterioArne JacobsenCharles WilliamsDante DoneganiDavid ChipperfieldDroog DesignEero SaarinenEzio DidoneFerruccio LavianiFrancesco RotaGae AulentiGio PontiJasper MorrisonJoe ColomboJozeph ForakisKarim RashidKonstantin GrcicMarc NewsonMarc SadlerMarcel WandersMarcello ZilianiMatteo ThunMax BillMichele De LucchiNaoto FukasawaPaolo RizzattoPatricia UrquiolaPhilippe StarckPierre PaulinRockwell GroupRodolfo DordoniRon RezekRoss LovegroveStefano GiovannoniTobia ScarpaTommaso CiminiValerio BottinVerner PantoneVico MagistrettiYaacov Kaufmann Продукт LinesAcquatinta PendantsAlt LucialternativeAqua Cil LampsArchimoon SeriesAtomium LightsAurora по LuminaAx20 LightsAxo ClaviusAxo Damasco LightAxo Koshi seriesAxo Light AuraAxo Light мяч seriesAxo Light GlitterAxo Light MarylinAxo Light NellyAxo Light PrimulaAxo Light ShirazAxo Light SubzeroAxo Оби LightAxo Юбка LightAxo Незначительные lightsAxo Spillray LightBallfinger LightingBerenice SeriesBombo CollectionBraun WatchBrera CollectionBubble seriesC’hi СерияСерия CabocheВыбрать лампуCicatrices CollectionCostanza seriesE.T.A., LightsElementi по LucePlanEloro Де MajoFairy Подвеска LeucosFalena SeriesFlos BelvedereFlos Fucsia CollectionFlos K SeriesFlos KelvinFlos Ray seriesFlos Romeo Moon LineFlowerpot VP LightFlute SeriesFontana Arte NobiFortebraccio LineFoscarini Дизель CollectionFoscarini HavanaFoscarini LumiereFoscarini TwiggyGlo Бал SeriesHope LucePlanIcone ArcoItka по Danese MilanoItre Ала seriesItre GiukoItre JJ LightJielde AugustinJielde LAKJielde Loft LampsJill seriesKaterina seriesKiss LightKTribe по FlosLebello CircusLebello FireLebello SolitaireLED Дверной звонок и NumbersLED RecessedLeucos AyersLeucos Bisquit seriesLeucos Diane seriesLeucos GocciaLeucos Golf seriesLeucos LagunaLeucos ModuloLeucos SpheraLeucos VittoriaLogico LampsLolita LightsLuccas по ModissLucePlan агавы seriesLucePlan Miranda SeriesLumina DaphineLumina NaomiLuxmaster по FlosLuxy CollectionMagis FirstMagis OneMagis Полосатый CollectionManhattan LightsMatrix CollectionMax Билл Junghans WatchMetropoli LucePlanMicronos LampsModiss C armenModiss Гретта seriesModiss JoeModiss Мария seriesModiss Martina seriesModiss MossiModiss TusscanaModiss TyboMoooi Бумага LineMuse Axo LightingNewPot PlantersNext падения LightsNur LampsOluce AtolloOluce Fiore LightsOluce LanternaOluce Паук LampPallucco Faro seriesPallucco FoldPallucco Glow seriesPallucco GuardianPenta AngelinaPenta C’hi LampsPenta Glo LampPipe по MagisPod объектива SeriesProduzione PrivataPurity seriesResolute BirdResolute Box seriesResolute Облако seriesResolute DavidResolute David 10Resolute David 16Resolute FortunaResolute Jack серияResolute Otto seriesResolute UtilityResolute VirtuResolute Watt LightsRezek by ArtemideRomeo Soft CollectionRotaliana DrinkSanta & Cole MoareSignal Jielde LampsStarck with Oregon ScientificSteelwood + MagisSunbrella PillowsTolomeo LampsTress LightsTropico LightsVas Bolio PotsViso Bolio

    Преодоление ингибирующего микроокружения, окружающего клетки-предшественники олигодендроцитов после экспериментальной демиелинизации .Среди этих сильно связанных генов гепарансульфатэндосульфатаза 2 (

    SULF2 ) была идентифицирована в OPC-ассоциированном модуле (M5). Анализ полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени (RT-PCR) подтвердил глубокое подавление регуляции во время дифференцировки hOPC in vitro (рис. 1a). Экспрессия SULF2 была относительно ограничена OPC, поскольку экспрессия матричной РНК (мРНК) SULF2 была > в 14 раз выше в первичных человеческих PDGFαR + OPC, чем CD133 + нейральных клеток-предшественников 19 .Аналогичным образом, экспрессия SULF2 поддерживалась в предрасположенных к олигодендроцитам PDGFαR + O4 + предшественниках 20 и A2B5 + OPC взрослого человека, но не была обогащена астроцитами взрослого человека или микроглиальными изолятами 80 90 90 .

    Рис. 1: Сульфатаза экспрессируется OPC мыши и человека.

    a ОТ-ПЦР-анализ мРНК SULF2 в первичных OPC человека во время дифференцировки in vitro с удалением PDGF-AA и без него (без GF) (среднее значение ± SEM, n  = 4 образца плода). b , c , белок SULF2 (зеленый) экспрессируется на низких уровнях в hOPC ( b ), и иммунореактивность значительно повышается после лечения ингибитором секреции белка брефельдином А (5  мкг/мл) ( c ) . Конфокальная микрофотография мРНК SULF2 (зеленый), экспрессирующих PDGFRA + OPC (красный), в головном мозге плода человека ( d ). e g Sulf1 и Sulf2 Экспрессию анализировали с помощью конфокальной микроскопии в мозолистом теле мыши во время нормального развития с помощью РНКоскопа in situ гибридизации и в сочетании с иммуногистохимией Olig2 (IHC) на 7-й день постнатального периода ( e 0 , h ), 28-й день ( f , i ) и в 24 недели ( g , j ).DAPI (синий), мРНК Sulf1 (серый), мРНК Sulf2 (зеленый), мРНК Pdgfra (красный) и белок Olig2 (голубой). Белые стрелки обозначают Pdgfra + OPC, экспрессирующие Sulf1 и Sulf2 . Масштаб: 100 мкм ( b , c ), 20 мкм ( d ) и 20 мкм ( e j ).

    Поскольку функция гепарансульфата не была тщательно изучена во время развития OPC, мы исследовали экспрессию генов, участвующих в биосинтезе HS, постсинтетических модификациях HS и основных белках HSPG в развитии мыши (дополнительная фигура 1).Мы наблюдали, что несколько генов, связанных с HS, подавлялись дифференцировкой. Понижающая регуляция генов биосинтеза HS во время дифференцировки OPC согласуется с предыдущими исследованиями, которые предполагали снижение содержания гепарана/HS во время дифференцировки OPC 22,23 . В совокупности эти находки указывают на то, что гепараном динамически регулируется в состоянии предшественников и становится более статичным по мере того, как OPCs дифференцируются в зрелые OLs. Примечательно, что мРНК обеих мышей Sulf1 и Sulf2 были почти полностью ограничены линией олигодендроцитов (дополнительная таблица 1).В отличие от мыши, секвенирование РНК (RNA-seq) первичных hOPC выявило очень высокие уровни экспрессии SULF2 (~ 100 FPKM), тогда как мРНК SULF1 практически не обнаруживалась (<0,5 FPKM) (дополнительная таблица 1). Экспрессия белка SULF2 была легко обнаружена в hOPC (рис. 1b). В соответствии с активной секрецией сульфатаз 16,24 , блокада секреторного пути брефельдином А приводила к накоплению цитоплазматического белка SULF2 в hOPC (рис. 1c).

    Мы наблюдали высокую экспрессию мРНК SULF2 in vivo, ограниченную подмножеством PDGFRA + OPC, расположенных в субвентрикулярной зоне человека и белом веществе головного мозга 22-недельного плода (рис.1г). В мозге недельной мыши почти все Pdgfra + OPC экспрессировали мРНК Sulf2 (рис. 1e и дополнительная фигура 2b), в то время как мРНК Sulf1 была ограничена подмножеством OPC (рис. 1h и Дополнительный рисунок 2b). Во время раннего постнатального развития обе сульфатазы также были обнаружены в незрелых олигодендроцитах, но экспрессия в олигодендроцитах не сохранялась у взрослых (рис. 1f–j). В соответствии с предыдущими отчетами 25 (Allen Brain Atlas), мРНК Sulf1 и Sulf2 были сильно экспрессированы в определенных слоях коры (дополнительная фигура 2c – f).мРНК Sulf2 также экспрессировалась небольшим подмножеством астроцитов Gfap + и клеток микроглии Iba1 + (дополнительная фигура 2g – j). В мозолистом теле взрослых мышей (24 недели) только Pdgfra + OPC сохраняли высокие уровни мРНК Sulf1/Sulf2 (рис. 1g, j). В сочетании с нашими данными об экспрессии в изолятах клеток человека эти результаты показывают, что OPC экспрессируют Sulf1 / Sulf2 на протяжении всего развития и во взрослом возрасте, что согласуется с функциональной ролью в гомеостазе OPC.

    Сульфатаза ингибирует продукцию олигодендроцитов после демиелинизации

    Мы изучили характер экспрессии сульфатазы после демиелинизации, индуцируя демиелинизацию в спинном мозге взрослых мышей с помощью фокальной инъекции лизолецитина. Мы наблюдали повышенную экспрессию мРНК Sulf1 и Sulf2 в поражении через 5 дней после повреждения (5 dpl) (рис. 2a, b). В этот момент OPC активно рекрутируются в очаг поражения. Мы наблюдали, что многие Pdgfra + OPC в поражении экспрессировали мРНК Sulf1 или Sulf2 (рис.2a–i), в то время как подмножество экспрессировало как Sulf1 , так и Sulf2 (рис. 2e, j). Как и в нормальном головном мозге, экспрессия Sulf2 была ограничена OPCs в неповрежденном белом веществе спинного мозга. Напротив, после демиелинизации Sulf2 также экспрессировался очень небольшим подмножеством астроцитов Gfap + и микроглии Iba1 + вблизи и внутри очага поражения, в то время как наблюдалось лишь очень небольшое количество Sulf1 + астроцитов. (Дополнительный рисунок 3).Следует отметить, что перициты Pdgfrb + не экспрессировали обнаруживаемый Sulf1 или Sulf2 после демиелинизации. Эти наблюдения предполагают, что обе сульфатазы активируются OPC после демиелинизации и что экспрессия сульфатазы в значительной степени ограничена OPC и клетками линии олигодендроцитов.

    Рис. 2: Условная генетическая абляция OPC-экспрессированного Sulf1/2 ускоряет рекрутирование олигодендроцитов и колонизацию поражений после демиелинизации.

    A J Двойной Rnascope In Situ Гибридизация (ISH) мышиного спинного мозга ( A E ) выявлено увеличено увеличено Sulf1 и Sulf2 экспрессии мРНК после лизолецитина, вызванной демиелицией ( F j ;5 d.п.л.). Sulf1 (серый), Sulf2 (зеленый) или Pdgfra мРНК (красный) и DAPI (синий). Желтые стрелки обозначают Pdgfra + OPC, которые совместно экспрессируют Sulf1/2 . Синие стрелки обозначают Sulf2 + Pdgfra + OPC или Sulf1 + Pdgfra + OPC. Изображения РНКоскопа были получены с помощью конфокальной микроскопии, другие — с использованием широкопольной эпифлуоресценции. Индуцируемая NG2creER-опосредованная OPC-специфическая абляция Sulf1 / 2 ( Sulf1/2 cKO) у взрослых мышей с последующей лизолецитин-индуцированной демиелинизацией ( k r ).Анализ динамики ОРС через 5 дней после повреждения (d.p.l.) ( o p ) ( n  = 6 и 3 мышей, для мышей WT и Sulf1/2 cKO соответственно) и 7 d.p.l. ( q r ) ( n  = 5 и 6 мышей, для WT и Sulf1/2 cKO соответственно). На 5 dpl плотность клеток Olig2 + была значительно увеличена в Sulf1/2 cKO ( o ) (** p  = 0,0016, двусторонний тест t ). Нет различий в доле пролиферирующих клеток EdU + Olig2 + по сравнению с клетками дикого типа ( p ).На 7 д. , ** p  = 0,0027 и 0,00071, двусторонний тест t ). Процент олигодендроцитов CC1 + Olig2 + среди клеток Olig2 + был увеличен у животных Sulf1/2 cKO по сравнению с контролем ( r , *** p  = 0.0009, двухсторонний тест t ). Показано среднее  ± SEM. Масштаб: 20 мкм ( A , F , C , H ), 40 мкМ ( B , г , D J ), и 10 мкм ( K и ).

    Чтобы определить функциональную роль OPC-экспрессируемых сульфатаз после демиелинизации, мы провели вызванную тамоксифеном условную абляцию Sulf1/Sulf2 за 1 неделю до индуцированной лизолецитином демиелинизации. Чтобы удалить Sulf1/2 именно из OPC взрослых особей, мы скрестили мышей NG2creER 26 с мышами Sulf1/Sulf2 27 .Контрольным однопометникам, у которых отсутствовала экспрессия cre, также вводили тамоксифен. На 5 dpl мы наблюдали значительное увеличение плотности клеток линии олигодендроцитов Olig2 + у мышей Sulf1/2 с условным нокаутом (cKO) по сравнению с мышами дикого типа (wt) ( n  = 3–6 мышей на группу, t тест p  < 0,01) (рис. 2л, м, о). Для оценки пролиферации OPC животным на конечной стадии вводили EdU. Увеличение плотности клеток Olig2 + не было связано с усилением пролиферации (EdU%, p  = 0.85) (рис. 2р). Это говорит о том, что удаление сульфатазы способствует созданию благоприятной микросреды для миграции и рекрутирования OPC.

    Значительно повышенная плотность клеток линии олигодендроцитов Olig2 + поддерживалась на уровне 7 д.пл. (рис. 2м, н). На 7 dpl у мышей Sulf1/2 cKO наблюдалось увеличение плотности клеток Olig2 + на 40% ( n  = 5–6 мышей, t test p  2q<0) (рис. 0   0). Вместе с увеличением общего количества клеток линии олигодендроцитов мы отметили 74% увеличение доли клеток CC1 + Olig2 + среди клеток Olig2 + в Sulf1/2 cKO по сравнению с контролем дикого типа ( p   0 .001) (рис. 2r). Это привело к увеличению плотности постмитотических олигодендроцитов Olig2 + CC1 + в 2,4 раза ( p  < 0,001). Интересно, что увеличение дифференцировки олигодендроцитов на этой стадии привело к относительному истощению клеток, определяемых Olig2 + CC1 на этой стадии.

    Чтобы более точно определить рекрутирование предшественников после демиелинизации, мы оценили плотность Pdgfra мРНК-определяемых OPC и незрелых олигодендроцитов на каждой стадии после демиелинизации и определили скорость пролиферации предшественников путем совместного мечения Pdgfra + OPCs с Ki67 (дополнительный рисунок 4).Как было показано ранее 28 , у животных дикого типа Pdgfra + плотность OPC была наибольшей при 5 d.p.l. и после этого постепенно снижалась (дополнительная фигура 4d). После Sulf1/2 cKO мы наблюдали значительное увеличение плотности Pdgfra + OPC как при 5, так и при 7 дпл. по сравнению с соответствующими контролями дикого типа (тест множественного сравнения Холма-Сидака, n  = 4–6 мышей, p  < 0,01) (дополнительная фигура 4d). К 14 д.пл. Sulf1/ 2-зависимое увеличение плотности OPC больше не присутствовало ( n  = 3–4 на группу, Holm-Sidak p  = 0.64). Доля делящихся Ki67 + OPC также уменьшилась за тот же период времени. В соответствии с приведенным выше анализом EdU (рис. 2P), Sulf1/2 cKO не влиял на долю Ki67 + Pdgfra + OPC на любой стадии после демиелинизации, что позволяет предположить, что Sulf1 не влиял на пролиферацию OPC. /2 абляция (Ki67%, Holm-Sidak p  = 0,99) (дополнительный рисунок 4e). Затем, чтобы определить, способствовала ли дифференциальная гибель клеток различиям, наблюдаемым в рекрутировании линии олигодендроцитов, мы проанализировали апоптоз с помощью расщепленной каспазы-3 в клеточной популяции Olig2 + (дополнительная фигура 4f–h).Различия в доле апоптотических OPC между Sulf1/2 cKO и мышами дикого типа не достигли значимости ( n  = 3–4, Holm-Sidak p  = 0,28) (дополнительная фигура 4h) и, как таковые, вероятно, не объясняют большие различия в наблюдаемой плотности клеток Olig2 + (рис. 2o, q). Таким образом, сульфатазы Sulf1/2 действуют, нарушая рекрутирование и раннюю дифференцировку OPC после демиелинизации.

    Индивидуальная делеция сульфатазы достаточна для улучшения образования олигодендроцитов после демиелинизации

    Sulf1/2 cKO на привлечение и дифференцировку OPC после демиелинизации через 7 дней.п.л. ( n  = 5–6 мышей на генотип) (рис. 3a–g). Интересно, что индивидуальная делеция Sulf2 привела к значительному увеличению плотности клеток линии олигодендроцитов Olig2 + , что напоминало плотность двойных cKOs Sulf1/2 (рис. 3e). Напротив, делеция Sulf1 приводила лишь к относительно небольшому увеличению плотности Olig2 + по сравнению с контролем (рис. 3e). Действительно, двусторонний дисперсионный анализ (ANOVA), рассматривающий Sulf1/2 как зависимые переменные, показал основное влияние генотипа Sulf2 , но не Sulf1 на пополнение Olig2 + ( Sulf2 p † ‡0001, Sulf2 p  = 0,67). В соответствии с общим механизмом было обнаружено значительное взаимодействие между Sulf1 и Sulf2 ( F (1, 17) = 15,8, p  = 0,001) (рис. 3e). Напротив, индивидуальная делеция либо Sulf1 , либо Sulf2 приводила к очень значительному увеличению плотности олигодендроцитов CC1 + Olig2 + по отношению к массе тела (двусторонний ANOVA, основные эффекты p  < 0.05). Очень значимое взаимодействие генотипов Sulf1 и Sulf2 на плотность клеток Olig2 + CC1 + также согласуется с общей функцией каждого гена ( F (1, 17) = 17,4, взаимодействие p  = 0,0006) (рис. 3f). Аналогичным образом, в качестве оценки дифференцировки доля клеток линии CC1 + Olig2 + среди клеток линии олигодендроцитов Olig2 + была увеличена после удаления Sulf1 или Sulf2 и сравнима с Sulf1/2 двойные мыши cKO ( F (1, 16) > 10, p  < 0.01 для основных эффектов и взаимодействия) (рис. 3g).

    Рис. 3: Делеция Sulf2 приводит к улучшению рекрутирования и дифференцировки олигодендроцитов и активируется при хронических активных поражениях РС.

    Тамоксифен-зависимая специфическая абляция Sulf1 , Sulf2 по отдельности или обоих Sulf1/2 в NG2 + OPC была начата до демиелинизации. Контрольных животных (отсутствующих cre) лечили аналогичным образом. Широкопольная иммунофлуоресценция для Olig2 (зеленый) и CC1 (красный) через 7 дней.п.л. ( а г ). Плотность (клетки / мм 2 ) олиг2 + олигодендроцитов. Лентальные клетки ( E ), OLIG2 + CC1 + постмитотические олигодендроциты ( F ) и процентное содержание CC1 + олигодендроцитов ( г ) был определен количественно ( n  = 5 для каждой группы, кроме n  = 6 для Sulf1/2 cKO). Показано среднее  ± SEM. Двусторонний ANOVA для генотипов Sulf1 и Sulf2. Пост-тест Холма-Сидака по сравнению сконтроль дикого типа *, **, *** и *** означает p  < 0,05, 0,01, 0,001 и 0,0001 соответственно. h j Первичные OPC человека, инфицированные лентивирусным нокдауном SULF2 (KD) или скремблированным контролем, культивировались в безмитогенных условиях в течение 4 дней. Дифференцировку олигодендроцитов оценивали с помощью иммуноцитохимии O4 (зеленый) и DAPI (синий) ( ч , i ). j SULF2 KD ускоренный O4 + Дифференцировка олигодендроцитов (**** p  < 0.0001 парный тест t , n  = 6 образцов плода человека). k Иммуногистохимия PLP1 хронического активного поражения MS человека и окружающего нормального белого вещества (NAWM). l РНКоскоп для PLP1 мРНК в NAWM (розовая коробка в k ). m p Гибридизация in situ с помощью конфокальной РНКоскопии на границе поражения (черный ящик в k ) для SULF2 (зеленый), PDGFRA (красный, n (красный) и 1 , p ) мРНК.Стрелка представляет совместную локализацию SULF2 с мРНК PDGFRA и PLP1 . Масштаб: 20 мкм ( a d , m p ) и 50 мкм ( i , j ).

    Вместе эти данные свидетельствуют о том, что Sulf1 и Sulf2 способствуют замедлению рекрутирования OPC и дифференцировке олигодендроцитов после демиелинизации. Поскольку делеция любой сульфатазы приводила к существенным изменениям плотности олигодендроцитов и клеток линии олигодендроцитов, ясно, что потеря либо Sulf1 , либо Sulf2 не была полностью компенсирована оставшимся геном сульфатазы.

    SULF2 ингибирует дифференцировку и миграцию hOPC и увеличивается в поражениях MS

    Установив, что Sulf2 может нарушать рекрутирование и дифференцировку OPC у мышей после демиелинизации, мы затем изучили функциональную роль экспрессии сульфатазы в очищенных hOPC. РНК-секвенирование и количественная ПЦР показали, что SULF2 была основной сульфатазой, экспрессируемой hOPC (дополнительная таблица 1 и дополнительная фигура 5a). Мы исследовали функцию SULF2 в hOPC после заражения лентивирусом, экспрессирующим короткую шпилечную РНК SULF2 (кшРНК) 29 , что значительно снизило экспрессию мРНК SULF2 на 72.9 ± 4,7% (дополнительная фигура 5b) ( p  < 0,0001, n  = 8 отдельных образцов плода). Важно отметить, что экспрессия мРНК SULF1 не увеличивалась при компенсации после нокдауна SULF2 (KD) (дополнительная фигура 5c) ( p  = 0,90) и оставалась на нижнем пределе обнаружения ( C t  > 30). Важно отметить, что SULF2 KD значительно ускорял дифференцировку олигодендроглии O4 + человека на 30% по сравнению со скремблированным контролем (рис.3I, к) ( n  = 6 проб, p  < 0,0001). Затем, чтобы оценить, модулирует ли SULF2 KD миграцию hOPC и, таким образом, может ли она напрямую регулировать рекрутирование OPC после демиелинизации, мы оценили миграцию в анализе на основе трансвелла после лечения либо WNT3, либо CXCL1 (дополнительная фигура 6). SULF2 KD устранял негативные эффекты обработки CXCL1 или WNT3A на миграцию OPC ( n  = 5 образцов, p  < 0,05). Наконец, чтобы определить, активно ли hOPC секретируют SULF2, мы провели слот-блот-анализ кондиционированных сред, а также клеточных лизатов (дополнительная фигура 5d).В соответствии с подавлением мРНК SULF2 при дифференцировке (рис. 1a), экспрессия как клеточного, так и секретируемого белка SULF2 снижалась во время дифференцировки hOPC.

    Поскольку SULF2 действовал, чтобы предотвратить эффективную дифференцировку hOPC in vitro, мы затем спросили, экспрессируется ли SULF2 OPC в мозге взрослого человека и в хронических активных демиелинизированных поражениях у вторично прогрессирующих пациентов с рассеянным склерозом ( n  = 2). мРНК SULF2 экспрессировалась с помощью PDGFRA + OPC в нормально выглядящем белом веществе и значительно увеличивалась вокруг границы демиелинизированного поражения (фиг.3л–р). Мы подтвердили, что эти транскрипты мРНК SULF2 были ограничены клетками OPC и олигодендроцитов путем их совместной локализации с транскриптами PDGFRA (рис. 3m, n) и PLP1 соответственно (рис. 3o, p). Почти все клетки PDGFRA + и PLP1 + , наблюдаемые на границе поражения, экспрессировали мРНК SULF2 . Вместе эти данные свидетельствуют о том, что SULF2 активируется аналогичным образом после демиелинизации в мозге человека и действует аналогичным образом in vitro, предотвращая эффективную дифференцировку OPC.

    Условная абляция сульфатазы ускоряет ремиелинизацию после демиелинизации Как наблюдалось на 5 и 7 дпл, демиелинизированные поражения были одинаковыми по размеру у

    Sulf1/2 cKO и контрольных мышей ( n  = 4, t test p  = 0.81) (рис. 4а, б). Удаление сульфатазы привело к 2-кратному увеличению плотности PLP1 + олигодендроцитов и 2,6-кратное увеличение олигов2 + CC1 + олигодендроцитов ( N = 4 на группу, P <0,05 ) (рис. 4c, d, k, l), как видно на 7 d.p.l. Аналогичным образом, повышенная плотность зрелых олигодендроцитов у животных Sulf1/2 cKO сопровождалась увеличением общей плотности клеток линии олигодендроцитов Olig2 + по сравнению с контролем дикого типа ( p  < 0.01) (рис. 4л). Плотность определяемых клеток Olig2 + CC1 была эквивалентна между группами при 14 dpl. (рис. 4l), как и плотность Pdgfra + OPC (дополнительный рисунок 4d). Процентное содержание олигодендроцитов Olig2 + CC1 + в популяции Olig2 + больше не увеличивалось при 14 д.пл. ( p  = 0,72) (рис. 4m). В совокупности Sulf1/2 cKO приводил к ускоренному набору OPC и дифференцировке новых олигодендроцитов, что приводило к увеличению плотности как зрелых олигодендроцитов, так и OPC после демиелинизации в ЦНС.

    Рис. 4: Условная абляция Sulf1/2 ускоряет ремиелинизацию.

    a , b Поражения, окрашенные солохромным цианином, через 14 дней после поражения (д.пл.). Дифференцировку олигодендроцитов оценивали с помощью Plp1 ISH ( c , d ) и иммунофлюоресценции Olig2 + CC1 + (Olig2, зеленый; CC1, красный) ( f , , , , , , , , , , , , , ). Астроглиоз оценивали с помощью Gfap (зеленый), а вставка изображения показывает изображение с большим увеличением, чтобы показать морфологию ( g , h ), а реакции микроглии оценивали с помощью Iba1 (красный) и вставку изображения с большим увеличением, показывающую морфологию ( i , j ).Количественная оценка PLP1 + олигодендроцитов. Плотность клеток ( K ) (* Указывает двухсторонний тест T P = 0,026; N = 4 мышей на группу), OLIG2 + и CC1 + плотность ( l ) (**указывает на общую плотность Olig2 + двусторонняя t тест p  = 0,0077; n  = 4 клетки в группе) и процентное содержание клеток СС91 80 90 Популяция Olig2 ( м ) ( n  = 3 и 4 мыши, для WT и Sulf1/2 cKO соответственно). n Средняя интенсивность флуоресценции (MFI) клеток Gfrap ( n  = 3 мышей на группу) и клеток Iba1 в очаге поражения ( n  = 4 и 3 мышей, для WT и Sulf1/2 cKO соответственно). o v Анализ ремиелинизации с помощью электронной микроскопии на 14 dpl. o , q Вставки показывают локализацию поражения в вентролатеральном белом веществе. s Доля ремиелинизированных аксонов (**указывает двусторонний t тест p  = 0.0061) и отношение t между диаметром аксона и отношением g (показана линейная регрессия). Частотное распределение отношения g ( u ) и диаметра аксона ( v ) в поражении ( n  = 4 мыши/группа, ≥400 аксонов). Показано среднее  ± SEM. Масштаб: 20 мкм ( a j ) и 5 ​​мкм ( o , q ) и 1000 нм ( p , r ).

    Поскольку сульфатазы, секретируемые OPC, могут регулировать локальную передачу сигналов в других типах клеток, мы исследовали влияние OPC-специфической делеции Sulf1/2 на активацию астроцитов и микроглии после демиелинизации.Мы не наблюдали различий в общем характере или интенсивности астроцитарной иммунореактивности Gfap ( p  = 0,66) (рис. 4g, h). Аналогичным образом, общее распределение и интенсивность окрашивания микроглии/макрофагов Iba1 + существенно не изменились под действием Sulf1/2 cKO ( p  = 0,26) (рис. 4i, j, n). Таким образом, хотя нельзя исключить паракринные эффекты OPC-экспрессированного Sulf1/2 , явных эффектов на глиотическую реакцию после демиелинизации не наблюдалось.

    Затем мы исследовали, может ли снижение активности сульфатазы в OPC ускорять ремиелинизацию (рис. 4o–v). Через 14 дней после пробуждения Sulf1/2 cKO значительно увеличивали долю ремиелинизированных аксонов олигодендроцитов по сравнению с контролем дикого типа ( n  = 4 мыши на группу, t test p  = 0,004s) (рис. 006s). Хотя небольшая часть аксонов была ремиелинизирована шванновскими клетками, мы не наблюдали каких-либо качественных различий в пропорции аксонов, миелинизированных шванновскими клетками, после Sulf1/2 cKO.В соответствии с ускорением дифференцировки олигодендроцитов толщина миелина была значительно увеличена в ремиелинизированных аксонах после делеции Sulf1/2 . Миелин g -ratio, который представляет отношение аксона к аксонам плюс диаметр миелина, был значительно снижен у Sulf1/2 cKO ( g -ratio, рассчитанный для n  = 4 мышей, t test р  < 0,05). Линейный регрессионный анализ индивидуальных g -ratio vs.диаметр аксона также продемонстрировал значительный эффект Sulf1/2 cKO (рис. 4t). Аналогичным образом, распределение г -отношений продемонстрировало значительное снижение частоты очень тонко миелинизированных аксонов, согласующееся с улучшенной инициацией ремиелинизации после Sulf1/2 cKO (двухсторонний ANOVA, Sidak post hoc, г -отношение 0,85 –0,9 p  = 0,0016 и 0,9–0,95 p  = 0,019) (рис. 4u). Sulf1/2 cKO не влиял на распределение диаметра аксонов в очаге поражения, что свидетельствует о том, что делеция Sulf1/2 не вызывала отек аксонов (рис.4т). Эти результаты показывают, что сульфатазы, экспрессируемые OPC, действуют как негативные регуляторы ремиелинизации клеточно-автономным образом.

    Передача сигналов WNT/BMP ингибирует дифференцировку олигодендроцитов после демиелинизации сульфатазозависимым образом

    Патологическая активация передачи сигналов BMP и WNT предотвращает эффективную ремиелинизацию путем ингибирования дифференцировки OPC 30,31,32 . Важно, что антагонизм передачи сигналов WNT или BMP может ускорять дифференцировку и ремиелинизацию OPC 33,34 .Поскольку было показано, что абляция сульфатазой ухудшает передачу сигналов BMP 35 и WNT 13 , мы предположили, что Sulf1/2 cKO увеличивает плотность олигодендроцитов из-за модуляции передачи сигналов WNT и BMP в OPCs. С этой целью мы использовали фармакологические подходы для специфической активации или инактивации передачи сигналов WNT или BMP в контексте делеции Sulf1/2 на 7 д.п.л. (Рис. 5а–м). В соответствии с предыдущими исследованиями и данными, представленными выше, двухфакторный дисперсионный анализ выявил значительное влияние лекарственного лечения и генотипа Sulf1/2 на все параметры, а также очень значимое взаимодействие между ними ( n  = 3–8 мышей в группе). .

    Рис. 5: Сульфатаза способствует ингибированию передачи сигналов WNT и BMP при дифференцировке олигодендроцитов после демиелинизации.

    Фармакологические манипуляции с передачей сигналов WNT и BMP проводили в контексте Sulf 1/2 cKO. Активатор пути WNT (CHIR-99021, 3 мкМ), антагонист пути WNT (XAV939, 100 нМ), активатор пути BMP (A01, 100 нМ) или антагонист рецептора (LDN-193189, 100 нМ) вводили совместно с лизолецитином. a j Плотность клеток линии олигодендроцитов оценивали с помощью широкопольной иммунофлуоресценции Olig2 (зеленый) и CC1 (красный).Плотность OLIG2 + олигодендроцитов линажных клеток ( K ), OLIG2 + CC1 + постмитотический олигодендроцит ( л ) и процентное содержание CC1 + олигодендроцитов ( м ) ( K m , n  = 8, 5, 4, 6, 8, 5, 4, 7, 5 и 3 мыши слева направо, для контрольных групп, CHIR, XAV, A01 и групп лечения LDN, у WT и мышей Sulf1/2 cKO соответственно). Был выполнен двухфакторный дисперсионный анализ (см. Исходные данные для получения полной информации).Тесты множественных сравнений Холма-Сидака с контролем дикого типа (синий *) или контролом Sulf1/2 cKO (красный *), или как указано. *, **, *** и **** означают p  < 0,05, <0,01, <0,001 и <0,0001 соответственно. n hOPC были коинфицированы лентивирусным SULF2 shRNAi или скремблированным контролем и лентивирусным репортерным вирусом TCF/LEF и подвергались воздействию WNT3A (50 нг/мл) или контрольного носителя. Двухсторонний RM ANOVA с последующим апостериорным тестом Холма-Сидака ( n  = 4 образца плода человека, среднее значение ± SEM, нормализованное к контролю). o hOPC, инфицированные лентивирусным репортером BMP и вирусом SULF2 KD. SULF2 KD снижал активность BMP в hOPC после обработки BMP7 (50 нг/мл) ( n  = 5, p  < 0,05, двухсторонний RM ANOVA, пост-тест Холма-Сидака). Двухсторонний ANOVA выявил значительные основные эффекты обработки лигандом, SULF2 KD и взаимодействия как для WNT, так и для BMP. p количественное определение дифференцировки олигодендроцитов O4 + после обработки SULF2 KD и BMP7 (5–50 нг/мл BMP7) ( n  = 5 при 5 нг/мл BMP7 и n 5  6 при  0 и  0 нг/мл BMP7 мл индивидуальных эмбриональных образцов BMP7 человека).Нокдаун SULF2 ослаблял эффекты передачи сигналов WNT/BMP и значительно усиливал дифференцировку hOPC в присутствии BMP (модель смешанных эффектов; пост-тест Сидака, p  < 0,05). * и ** обозначают p  < 0,05 и < 0,01 соответственно. Показано среднее  ± SEM. Масштаб: 20  мкм ( a j ). нс Незначительный.

    Как было показано ранее при генетической активации передачи сигналов WNT 32 , фармакологическая активация WNT с помощью CHIR-99021 (3  мкМ) у животных дикого типа приводила к значительному нарушению дифференцировки со снижением плотности CC1 + Olig2 + олигодендроцитов ( n  = 4 и 8 соответственно, критерий множественного сравнения Холма-Сидака p  < 0.05) (рис. 5l) и снижение доли олигодендроцитов CC1 + Olig2 + среди общего количества клеток Olig2 + (Holm-Sidak p  < 0,001) (рис. 5m) после демиелинизации. Аналогичным образом, ингибитор танкиразы XAV939 (0,1 мкМ), который блокирует передачу сигналов WNT, значительно стимулировал дифференцировку олигодендроцитов у мышей дикого типа, измеренную как плотность CC1 + Olig2 + и CC1% при 7 dpl. (Hold-Sidak p  < 0,0001), как показано ранее 33 .Как описано выше, Sulf1/2 cKO значительно увеличивал оба показателя дифференцировки. В контексте Sulf1/2 cKO активация WNT (CHIR-99021) не смогла блокировать дифференцировку олигодендроцитов (Olig2 + CC1 + плотность p  = 0,78, CC1% p  0,78 (рис. . 5л, м). Аналогично, дополнительный антагонизм WNT с помощью XAV939 не усиливал дальнейшее увеличение дифференцировки олигодендроцитов, обеспечиваемое Sulf1/2 cKO (Olig2 + CC1 + , плотность p  = 0.78, CC1% p  = 0,97). Таким образом, делеция Sulf1/2 в OPC способствует дифференцировке олигодендроцитов в присутствии активации WNT, но не способна действовать аддитивно при лечении антагонистом WNT для дальнейшего улучшения образования олигодендроцитов. Таким образом, эти результаты согласуются с ролью Sulf1/2 в регуляции передачи сигналов WNT, но также подчеркивают возможность того, что другие пути передачи сигналов модулируются, чтобы стимулировать образование олигодендроцитов после демиелинизации независимо от активации WNT.

    Затем мы использовали A01 (100 нМ) для ингибирования лигазы E3 Smurf1 и тем самым активировали внутриклеточную передачу сигналов BMP 36 и антагонист рецептора BMP типа I LDN-193189 (100 нМ) для противодействия передаче сигналов BMP (рис. 5a–m). У диких животных фармакологическая активация BMP (A01) значительно снижала плотность олигодендроцитов Olig2 + CC1 + и процент CC1 + (Holm-Sidak p  < 0,05 и p  0,0 ) (m Fig. ). Напротив, антагонист рецептора BMP (LDN) увеличивал все три параметра, общую плотность Olig2 + (Holm-Sidak p  = 0.0004) (рис. 5k), плотность CC1 + ( p  < 0,0001) (рис. 5l) и %CC1 ( p  < 0,0001) (рис. 5m). У мышей Sulf1/2 cKO внутриклеточная активация BMP посредством обработки A01 снижала дифференцировку олигодендроцитов (плотность Olig2 + CC1 + и CC1%) по сравнению с Sulf1/2 cKO отдельно (рис. 5l, m). Однако этот уровень дифференциации был значительно выше по сравнению с диким типом, что указывает на то, что эффект Sulf1/2 cKO все еще эффективен в контексте чрезмерной активации BMP.Напротив, Sulf1/2 cKO не усиливал дифференцировку олигодендроцитов у животных, получавших антагонист рецептора BMP (LDN) (Hold-Sidak, Olig2 + CC1 + плотность p  = 0,97, CC1% p = 0,14) (рис. 5м, м). Взаимодействие между лечением антагонистом рецептора BMP и сульфатазой предполагает, что сульфатаза действует посредством передачи сигналов BMP.

    Поскольку модуляция этих путей может происходить на нескольких уровнях, мы затем спросили, модулирует ли сульфатаза передачу сигналов WNT и BMP непосредственно в hOPC.С этой целью скремблированный контроль или SULF2 KD hOPC трансдуцировали вирусными репортерами для передачи сигналов WNT и BMP. WNT-зависимая репортерная люцифераза TCF была >11-кратно индуцирована после обработки WNT3a ( n  = 4 образца плода) (рис. 5n). Поразительно, но SULF2 KD значительно ослаблял индукцию WNT более чем на 35%. Аналогичным образом, люцифераза, зависящая от BMP response element (BRE), была увеличена более чем в 18 раз при обработке BMP7, и эта BMP-индуцированная активность люциферазы BRE была значительно ингибирована SULF2 KD (фиг.5о). Двусторонний ANOVA выявил значительный эффект взаимодействия между SULF2 KD и передачей сигналов WNT и BMP ( p  < 0,05) и согласовывался с прямым влиянием сульфатазы на эти сигнальные пути. Чтобы дополнительно проверить, может ли SULF2 KD напрямую влиять на эффекты передачи сигналов BMP на судьбу hOPC, мы обработали SULF2 KD и смешали инфицированные hOPC с BMP7 и оценили влияние на дифференцировку олигодендроцитов O4 + ( n  = 5–6 образцов плода). (Дополнительный рисунок 7).Как было показано ранее 37 , обработка BMP7 ингибировала дифференцировку O4 + из hOPC (двусторонний ANOVA, p  < 0,0001) (рис. 5p). Важно отметить, что SULF2 KD значительно снижал эффекты BMP7 (5 нг/мл, тест Холда-Сидака p  = 0,0029; 50 нг/мл, p  = 0,017). Таким образом, сульфатаза, экспрессируемая hOPCs, непосредственно усиливает передачу сигналов как WNT, так и BMP, и согласуется с тем, что сульфатазы выполняют клеточно-автономную роль в OPCs.

    PI-88 модулирует сульфатирование OPC и регулирует передачу сигналов BMP и WNT в hOPC

    Поскольку сульфатазы действуют во внеклеточном пространстве, они представляют собой фармакологически значимую мишень для манипуляций при демиелинизирующих заболеваниях.PI-88, сильно сульфатированный структурный миметик гепарансульфата, действует как нерасщепляемый субстрат и ингибитор сульфатаз 38,39 и в настоящее время проходит клинические испытания для лечения рака. Сначала мы оценили базальное сульфатирование HS на первичных OPC крысы CG-4 и человека с помощью проточной цитометрии с использованием антитела RB4CD12, которое распознает сильно сульфатированные мотивы HS GAG 40 (рис. 6a, b). Обработка PI-88 вызывала прогрессирующее и стойкое обогащение сульфатом HS через 30 минут и 24 часа (рис. 6b).

    Рис. 6: PI-88 ингибирует сульфатазы, что приводит к усилению сульфатирования HSPG и ингибированию передачи сигналов WNT и BMP в OPC.

    a , b Проточная цитометрия сульфатирования HS с использованием антитела RB4CD12 на крысином CG-4 ( a ) и первичных OPCs человека ( b ). Контроль антител не показан (серый). Обработка PI-88 (100 мкг/мл) приводила к явному увеличению сульфатирования OPC в зависимости от времени. c , d Вестерн-блоты для активного β-катенина (αABC) и фосфорилированного Smad 1/5 (p-Smad) после обработки OPC крыс CG-4, обработанных BMP7, WNT3a (оба 50 нг/мл), и /или PI-88 (100 мкг/мл). e , f Кривые доза-реакция для репортерной активности WNT и BMP в присутствии/отсутствии PI-88 (20  ч после обработки, n  = 3, односторонний ANOVA). ** и *** указывают на значительный эффект PI-88 по посттесту Даннета p  < 0,01 и <0,001 соответственно. г первичных OPC человека были инфицированы лентивирусным репортером TCF и обработаны PI-88 (2  мкг/мл) и/или WNT3a (50 нг/мл) ( n  = 3 образца плода человека, нормализованное среднее  ± SEM). h Аналогично, hOPC инфицировали репортером, зависимым от элемента ответа BMP, и обрабатывали PI-88 и/или BMP7 (n  = 3). г , ч Двухфакторный дисперсионный анализ выявил значительные эффекты лечения WNT/BMP и PI-88, * и **** означают пост-тест Сидака p  < 0,05 и <0,001 соответственно. i n Влияние обработки PI-88 на дифференцировку hOPC оценивали в контексте обработки ингибитором BMP. hOPC обрабатывали BMP и/или PI-88, а дифференцировку олигодендроцитов O4 + (красный) и GFAP + (зеленый) оценивали после удаления митогенов.Количественное определение O4% ( m , n  = 5 образцов плода) и GFAP% ( n , n  = 3 образца плода). Двухсторонний RM ANOVA выявил значительное влияние BMP и PI-88 на дифференцировку O4 + (основной эффект p  < 0,05). Показано среднее  ± SEM. Масштаб: 50 мкм.

    Затем мы исследовали, может ли PI-88 посредством индуцированного повышенного сульфатирования HS ингибировать передачу сигналов WNT и BMP в OPC. В крысиных клетках CG-4 активированный β-катенин, нижестоящий эффектор канонической передачи сигналов WNT, в значительной степени индуцировался после обработки WNT3a (рис.6в). Важно отметить, что лечение PI-88 эффективно блокировало действие WNT3a. Аналогичным образом, PI-88 ослаблял BMP7-индуцированное фосфорилирование Smad 1/5 (фосфо-Smad (p-Smad)) (рис. 6d). Используя экспрессирующие люциферазу лентивирусные репортеры передачи сигналов WNT и BMP, мы обнаружили, что PI-88 проявляет четкий дозозависимый эффект и противодействует передаче сигналов WNT и BMP с полумаксимальными ингибирующими концентрациями 0,38 и 0,89 мкг/мл для WNT3a и BMP7 соответственно. Рис. 6д, е).

    Затем мы исследовали влияние PI-88 на первичную передачу сигналов OPC человека.hOPC, инфицированные лентивирусным репортером, обрабатывали лигандами BMP/WNT и/или PI-88. Обработка BMP и лиганда WNT (50 нг/мл) индуцировала сильное > 15-кратное увеличение репортерной активности (двусторонний ANOVA, p  < 0,05), которое было значительно ослаблено PI-88 (рис. 6g, h). Обработка только PI-88 не влияла на активность BMP или WNT-зависимой люциферазы. Интересно, что когда мы сравнили влияние лечения PI-88 на люциферазу, индуцированную WNT/BMP в низких и высоких дозах, мы наблюдали аналогичное снижение активности люциферазы после лечения PI-88 (дополнительная фигура 8).Это говорит о том, что эффект PI-88 является неконкурентным и согласуется с ингибированием сульфатазы, а не с прямым связыванием агониста или другим механизмом, опосредованным рецептором. Таким образом, мы пришли к выводу, что PI-88 способен ингибировать передачу сигналов BMP и WNT посредством ингибирования сульфатазы как у крыс, так и у hOPC.

    PI-88 восстанавливает опосредованное BMP7 ингибирование дифференцировки hOPC in vitro

    Ингибирующее действие обработки PI-88 на BMP-индуцированную транскрипцию позволяет предположить, что опосредованное PI-88 ингибирование активности сульфатазы может предотвратить опосредованное BMP воздействие на OPC судьба клетки 37 .hOPC культивировали после удаления митогена для индуцирования дифференцировки олигодендроцитов. Как описано выше, BMP7 (5 нг/мл) блокировал дифференцировку O4 + ( n  = 4 образца плода, двусторонний дисперсионный анализ с повторными измерениями p  = 0,0006) (рис. 6m). После обработки BMP7 обработка PI-88 значительно увеличивала дифференцировку O4 + (Holm-Sidak p  = 0,035). Точно так же BMP7 индуцирует судьбу GFAP + астроцитов из hOPC (рис. 6n). После обработки PI-88 BMP7 не смог значительно повысить дифференцировку астроцитов.В отсутствие BMP7 PI-88 существенно не изменял судьбу hOPC. Взятые вместе, эти результаты предполагают, что фармакологически смещение hOPC в сторону состояния повышенного 6-O сульфатирования является фенотипически релевантным, противостоя BMP7-опосредованной индукции астроцитарной судьбы in vitro.

    PI-88 способствует дифференцировке и ремиелинизации олигодендроцитов после очаговой демиелинизации

    Поскольку PI-88 был способен эффективно модулировать сульфатирование HS и противодействовать передаче сигналов WNT и BMP in vitro, мы затем спросили, может ли ингибирование сульфатазы PI-88 модулировать ремиелинизацию.PI-88 (10  мкг/мл) или физиологический раствор вводили совместно с лизолецитином. При 3 днях на пл PI-88 не влиял на размер поражения, микроглиальную инфильтрацию или астроглиоз. Потеря олигодендроцитов и OPC в поражении также была полной в обеих группах (дополнительная фигура 9). Таким образом, образование поражений было неразличимым у животных, получавших PI-88, и у животных, не получавших лечение. На 5 dpl во время набора OPC мы наблюдали значительное >25% увеличение плотности Olig2 + после обработки PI-88 ( n  = 6–7 мышей, t test p  = 0.008) (рис. 7а, б, л), что не было связано с усилением пролиферации (EdU%, p  = 0,78) (рис. 7л). Подобно нашим наблюдениям после Sulf1/2 cKO, лечение PI-88 не оказывало заметного влияния на астроцитарные или микроглиальные ответы при 7  д.пл. (Рис. 7g, j и дополнительный рисунок 10). На 7 dpl плотность олигодендроцитов, определяемая как плотность клеток Plp1 + или CC1 + Olig2 + , была значительно увеличена под действием PI-88 ( n   , оба < 0.05) (рис. 7м, н). Подобно Sulf1/2 cKO, общая плотность клеток линии олигодендроцитов Olig2 + была значительно увеличена при обработке PI-88 ( p  = 0,037) (рис. 7n). В соответствии с ускоренной дифференцировкой процент олигодендроцитов CC1 + среди общего количества Olig2 + был значительно увеличен под действием PI-88 ( n  = 6–7) (рис. 7o). Таким образом, обработка PI-88 действует подобно Sulf1/2 cKO, приводя к увеличению плотности олигодендроцитов после демиелинизации.

    Рис. 7: Ингибитор сульфатазы PI-88 способствует дифференцировке OPC и ремиелинизации после демиелинизации.

    PI-88 вводили в демиелинизированные поражения спинного мозга взрослых мышей во время инъекции лизолецитина. a , b Olig2 + рекрутирование и пролиферацию (EdU + Olig2 + ) оценивали через 5 дней после поражения (d.p.l.) с помощью широкопольной эпифлуоресценции (Olig2, зеленый; EdU, красный). c j Плотность линии олигодендроцитов (Olig2, зеленый), дифференцировку (Plp1 и CC1, красный) и реакцию микроглии/астроцитов оценивали через 7 дней.п.л. (Gfap, зеленый; Iba1, красный). Плотность и дифференцировку олигодендроцитов оценивали с помощью Plp1 in situ ( c , d ) и иммунофлуоресценции Olig2/CC1 ( e , f ). g j Ответы астроцитов и микроглии оценивали с помощью Gfap и Iba1 соответственно, а на вставках изображений показано изображение с большим увеличением для демонстрации морфологии. k , l количественное определение плотности Olig2 + (** указывает двусторонний t тест p  = 0.0079) и процент клеток EdU + среди общего количества Olig2 при 5  д.пл. ( n  = 6 контроль, n  = 4 для мышей, получавших PI-88). м o На 7 д.п.л. Количественная оценка PLP1 + плотность клетки ( м ) (** Указывает, что два-хвостаревые T тест P = 0,0048, N = 4 мышей на группу), OLIG2 + и CC1 + и CC1 + Olig2 + плотность клеток ( n ) (* указывает на общую Olig2 + двусторонний t тест p  = 0.037) и процент клеток СС1 + в популяции Olig2 ( o ) (* указывает на двухвостых t test p  = 0,049, n  =2  8  8  8 контрольных мышей, n  =2  8  8 900 мышей для PI-88). p w Анализ ремиелинизации с помощью ЭМ на 14 д.пл. ( n  = 5 мышей на группу). p , r Вкладыши с указанием локализации поражения в вентролатеральном белом веществе. t Доля ремиелинизированных аксонов (* указывает на двусторонний t тест p  = 0.040) и отношение u между диаметром аксона и отношением g (показана линейная регрессия). Частотное распределение отношения g аксонов ( против ) и диаметра аксона ( w ) в очаге поражения. *, ** указывают двусторонний t тест p  < 0,05 и 0,01 соответственно. Показано среднее  ± SEM. Масштаб: 20 мкм ( a j ) и 5 мкм ( p r ) и 1000 нм ( q s ).

    Затем мы исследовали, приводит ли усиленная дифференцировка после обработки PI-88 к ускоренной ремиелинизации (рис.7р–с). Мы обнаружили, что лечение PI-88 значительно увеличило долю ремиелинизированных аксонов на 14-й день рождения. ( n  = 5 мышей на группу, t тест p  = 0,040) (рис. 7t). Линейный регрессионный анализ диаметра аксона по сравнению с соотношением г продемонстрировал значительное снижение соотношения г после лечения PI-88 (рис. 7u). Аналогичным образом, распределение г -соотношений, распределенных по диаметру аксона, было смещено влево и указывало на увеличение толщины миелиновой оболочки у мышей, получавших PI-88 (фиг.7т). Подобно Sulf1/2 cKO, обработка PI-88 не вызывала набухания аксонов, что подтверждается частотным распределением диаметров аксонов (рис. 7w). Вместе эти данные демонстрируют, что обработка PI-88 способствовала как дифференцировке OPC, так и ускорению ремиелинизации после демиелинизации.

    Индуцированная PI-88 дифференцировка олигодендроцитов после дифференцировки опосредована ингибированием сульфатазы

    мышей с PI-88 в контексте OPC-специфической делеции сульфатазы (т.е., Sulf1/2 cKO). Мы индуцировали лизолецитиновые поражения у Sulf1/2 cKO и обрабатывали их PI-88 ( n  = 4–5 мышей на группу) (рис. 8). Как описано выше, обработка PI-88 или Sulf1/2 cKO отдельно значительно увеличивала плотность линии олигодендроцитов Olig2 + (рис. 8m), плотность Olig2 + CC1 + (рис. 8n) и долю CC1 + олигодендроцитов (рис. 8n). Важно отметить, что мы не наблюдали аддитивного эффекта лечения PI-88 на мышах Sulf1/2 cKO по этим параметрам (рис.8 мес.). Двусторонний ANOVA выявил весьма значимое взаимодействие между генотипом и обработкой PI-88 по всем параметрам. Таким образом, PI-88, вероятно, приводит к усилению дифференцировки олигодендроцитов в первую очередь за счет ингибирования OPC-экспрессированного Sulf1/2 .

    Рис. 8: Лечение PI-88 ускоряет дифференцировку OL посредством ингибирования Sulf1/2 после демиелинизации. Мышей

    дикого типа (WT) и Sulf1/2 cKO подвергали фокальной демиелинизации спинного мозга с инъекцией PI-88 или без нее и умерщвляли через 7 дней после повреждения. a d Olig2 (зеленый)/CC1 (красный) иммунофлюоресценция. e l Гибридизация in situ с помощью конфокальной РНКоскопии для OPC-экспрессированного Pdgfra (красный) и либо гена-мишени WNT Apcdd1 (зеленый, e h ), либо гена-мишени BMP 90 9081 Id 42 9081 Id 42 081 , i l ). Стрелки указывают на OPC с двойной меткой. M M O Количественное количество плотности линии олигодендроцитов (OLIG2 + , N = 4 мышей для WT, N = 5 мышей для Sulf1 / 2 CKO Groups), Postmiticic CC1 + клеток Olig2 + ( n ) ( n  = 4 мыши на группу) и процент клеток CC1 + в популяции Olig2 ( o ) ( n мышей на группу) ).Количественное определение активности пути WNT Appcd1 % ( p ) ( n  = 5 мышей для контрольного WT и обработанного PI-88 WT, n  = 6 для контроля Sulf1/2  9000 cKO1 и 4 для обработанных PI-88 Sulf1/2 cKO) и активности пути BMP Id4 % ( q ) ( n  = 4 мышей для контрольных диких животных и обработанных PI-88 Sulf1/2 cKO81 и cKO81) n  = 5 для обработанных PI-88 WT и контрольных групп Sulf1/2 cKO) среди Pdgfra + OPC.Показано среднее  ± SEM. *, **, *** и **** обозначают двухфакторный дисперсионный анализ Холма-Сидака после теста p  < 0,05, <0,01, <0,001 и <0,0001 соответственно. Масштаб: 20 мкм.

    Наконец, чтобы определить, может ли PI-88 аналогичным образом регулировать передачу сигналов WNT и BMP и оказывать продифференцирующий эффект через антагонизм WNT/BMP, мы исследовали экспрессию генов-мишеней WNT и BMP после Sulf1/2 cKO и/или Обработка PI-88 с использованием гибридизации in situ (рис. 8e–l). Подобно нашим результатам с использованием фармакологических манипуляций с путями WNT и BMP, мы наблюдали значительное снижение экспрессии Apcdd1 (мишень WNT) и Id4 (мишень BMP) у мышей Pdgfra + OPCs у мышей Sulf1/2 cKO. (двусторонний ANOVA, Sulf1/2 cKO основные эффекты p  = 0.0003 и 0,0019 для Apcdd1 и Id4 соответственно, n  = 4–6 мышей на группу) (рис. 8p, q). Аналогичным образом, обработка только PI-88 значительно ингибировала экспрессию обоих генов в Pdgfra + OPC (двусторонний ANOVA, эффект PI-88 p  = 0,0021 и 0,0019 для Apcdd1 и Id, соответственно). Комбинированное лечение PI-88 у мышей Sulf1/2 cKO не вызывало значительного снижения экспрессии гена-мишени WNT или BMP по сравнению с введением только Sulf1/2 cKO (Holm-Sidak, оба p  > 0.5). Эти наблюдения предполагают, что PI-88 действует через OPC-экспрессированный Sulf1/2 , влияя на передачу сигналов BMP и WNT в OPC и тем самым способствуя восстановлению миелина.

    Huard: Каковы первые слухи о футболе UW Huskies?

    Сказать, что сезон 2021 года был разочаровывающим для футбола UW Huskies, было бы преуменьшением.

    Ранее: Что происходит с первым курсом DeBoer по набору UW Huskies?

    Несмотря на то, что «Хаски» заняли первое место.22-я команда в стране, пребывание UW в топ-25 не продлится долго. Dawgs открылись на ошеломляюще низкой ноте, проиграв Монтане, команде FCS, и, хотя у Хаски все еще был шанс на приглашение в чашу, вступить в соперничающую игру против № 6 Орегона со счетом 4-4, это было как поражение в «Утки» и последнюю игру главного тренера Джимми Лейка, который сначала был дисквалифицирован, а затем уволен после того, как было замечено, что он клал руки на игрока в стороне.

    «Хаски» проиграли свои последние две игры в году, в том числе первое поражение в Apple Cup против штата Вашингтон с 2012 года, а их общий результат 4–8 стал худшим результатом программы в конце сезона с сезона 0–12 в 2008 году.

    Лейк и почти весь его тренерский штаб отсутствовали, в то время как Кален ДеБоер и его команда перешли на 2022 год. Бульдоги установили общий рекорд 12–6 в 2020 и 2021 годах. ДеБоер также был главным тренером в NAIA Sioux Falls, своей альма-матер, где он выиграл 67–3 за пять сезонов с тремя национальными титулами.

    Футбольную программу UW Huskies смотрит легенда хаски Брок Хуард, ведущий программы Seattle Sports 710 AM, а также футбольный аналитик FOX Sports.Помимо того, что он сам является легендарным квотербеком UW Huskies, брат Хуарда Деймон также снялся в программе, а сын Дэймона Сэм начинает свой сезон новичка в красной рубашке в Монтлейке.

    Скоро состоится весенняя игра The Huskies 30 апреля, так какие последние слухи вокруг этой программы? Хуард поделился некоторыми быстрыми мыслями и впечатлениями с приглашенным ведущим Бобом Стелтоном в последнем подкасте Брока и Солка для Seattle Sports, и, как вы можете себе представить, шум вокруг ДеБоера и его тренерского штаба берет бразды правления в Вашингтоне.

    «Ранний шум — это человек, какой облом, что это не был персонал, который последовал за Крисом Петерсеном. Это первые слухи», — сказал Хуард.

    Петерсен возглавлял программу с 2014 по 2019 год, заработав за это время 55-26 очков с двумя чемпионатами Pac-12, выходом в плей-офф College Football и тремя играми в New Year’s Six bowl. Петерсен ушел в отставку после того, как в 2019 году его преемником был назначен Лейк, его координатор защиты.

    — К сожалению, я бы поставил на успех Джимми Лейка, — сказал Хуард.«Он был для меня более чем квалифицированным. Я ошибся в этом. Я думал, что он был готов к этой должности. Он не был, он плохо справлялся с этим, обращался с людьми еще хуже».

    В результате ДеБоер и Ко унаследовали программу, которая хуже, чем та, которую Лейк унаследовал от Петерсена.

    «Реальность верна, отправления верны, вербовка верна. Они тонкие, — сказал Хуард. «Они не там, где должны быть, чтобы конкурировать с штатом Орегон — или, в некотором смысле, даже с Университетом Южной Калифорнии в пуле лучших талантов, штат Юта, который очень стабилен на этой конференции — из-за некоторых потерь в рекрутинге, из-за некоторых трансферы.

    При этом Хуард и другие очень впечатлены ДеБоером и его сотрудниками, так как они взяли на себя управление программой.

    «Кален ДеБоер и его штаб, нападение и защита — я вернусь к слову, которое я использую с квотербеком «Сихокс» Дрю Локом: настоящий», — сказал Хуард. «Маятник качнулся. И маятник качнулся в сторону очень настоящего парня из Южной Дакоты, соли земли, который отлично подойдет».

    Хотя Хуард считает, что ДеБоер хорошо подходит для управления UW Huskies, он также проповедует терпение, особенно с новыми правилами имени, изображения и сходства (NIL) для спортсменов колледжей.

    — Это займет немного времени, — сказал он. «И для меня тренерская работа не будет проблемой. Просто вовремя появится возможность привлечь таланты, когда вы соревнуетесь с NIL с USC и NIL с Орегоном, а также со стабильностью некоторых других программ на конференции».

    Слушайте последний подкаст Брока и Солка по этой ссылке или в плеере ниже.

    Ной Уильямс переходит из мужских обручей WSU в UW Huskies

    Подписаться @@TheBGustafson

    окружающих — Англо-испанский словарь — WordReference.ком

    WordReference English-Испанский словарь © 2022:

    NOMPRE MASCULINO NMPL : Sustantivo Masculino Que SE USA NUCHICAMETE EN множественное число, Con Los Artículos LOS O UNOS . Ejemplos: los maritations, unos víveres.
    Окружающие Прилагательное ADJ : описывает существительное или местоимение — например, « Right девушка», — интересная книга», « большой дом. (вокруг, в районе) circundante adj mf adjetivo de una sola terminación : Adjetivos de una sola terminación en single («любезный», «constante») pero que sí varían en множественное число (» Abables «,» Константа «).
    Отель хорошо расположен для изучения окружающей страны.
    EL Hotel Tiene Una Buena Ubicación Para RecoRer El Campo Chincundante.
    прил прилагательное : Описывает существительное или местоимение, например, « высокая девушка», « интересная книга», « большой дом. (окружающий, охватывающий) circundante adj mf adjetivo de una sola terminación : Adjetivos de una sola terminación en единственное число («любовный», «постоянный») pero que sí varían en множественное число («любовный», «постоянный») «Константины»).
    912 Вандалы сделали отверстия в окрестностях.
    Los Vándalos Han Hecho Agujeros en la Cerca Cerca Circundante.
    Окрестности NPL множественное число Neoun : Существительное всегда используется во множественном числе, например, «джинсы», «ножницы».» (Environs, окружающая среда) Entrono NM NOMBRE MASCULINO : Sustantivo de Género Exclusivamente Masculino, Que Lleva Los Artículos EL O UN EN Singulary, Y LOS O UNOS RU множественное число. Exemplos: El Televisor, Un Piso. ALREDEDEDORES
      Я проснулся в незнакомом мне окружении.
      Me desperté en un entorno que no reconocí.

    WordReference English-Spanish Словарь © 2022:

    9

    SURM [STH],
    Surround [SB] ⇒
    VTR Переходный глагол : глагол, принимающий прямой объект -например, « Скажи что-нибудь .«Она нашла кошку». «,» Encontre Una Moneda «).
    RODEAR A VTR + PREP
    Полиция в окружении здания.
    La Policía Rodeó El Edificio .
    окружить [sth],
    окружить [sb]
    vtr переходный глагол : Глагол с прямым дополнением — например, « Скажи что-нибудь». «Она нашла кошку».
    (быть повсюду) rodear⇒ vtr verbotransivo : Verbo que requiere de un objeto directo (« di la verdad», « encontré una moneda»).
        родеар vtr + преп
      Нас окружали пышные лиственные растения.
      Estábamos rodeados de plantas con hojas frondosas.
      Esta oracion no es una traducción de la original. Rodeamos nuestros enemigos con nuestra sublime estrategia militar.
    Surround N N Noun : относится к человеку, место, вещь, качество, качество и т. Д. (столярные изделия: окантовки) Borde NM Nombre Masculino : Sustantivo de Género Exclusivamente Masculino, que lleva los artículos el o un в единственном числе, y los o unos во множественном числе. Примеры: el televisor, un piso.
    Cercado NM NOMCRE MASCULINO : Sustantivo de Género Exclusivamente Masculino, Que Lleva Los Artículos EL O UN EN Singulary, Y LOS O UNOS EN UNOS RU множественное число. Примеры: el televisor, un piso.
    CERCA NF NOMBRE FEMENINO : Sustantivo de Géneoo Exclusivamente Femenino, Que Lleva Los Artículos LA O UNA EN Сингулярные, Y LAS O UNAS RU множественное число. Примеры: la mesa, una tabla.
      Он построил ограду для сада.
      Él construyó un borde para el jardín.
      Él construyó un cercado para el jardín.
      Él construyó una cerca para el jardín.
    Allededor de, AL Rededor de Loc Prep Locución Preposicional : Unidad Léceica Angable DomaDa de Dos o Más Palabras que Funciona Como Preposición («AFT),« EN TORNO A »).
    Доп. (окружающая среда) (окружающая среда) NOMBRE NM NOMPRE MASCULINO : Sustantivo de Género Exclusivamente Masculino, Que Lleva Los Artículos EL O UN EN Сингулярные, Y LOS O UNOS RU . Примеры: el televisor, un piso.
      Столовая оформлена в ближневосточном стиле и звучит живая музыка.
      El comedor estaba decorado en el entorno de Oriente Medio y tenía música en directo.
    объемный [sth/sb]⇒ vtr переходный глагол : Глагол с прямым дополнением — например, « Скажи что-нибудь». «Она нашла кошку». (быть связанным с) rodear⇒ vtr verbotransivo : Verbo que requiere de un objeto directo (« di la verdad», « encontré una moneda»).
        enttorno a loc prep locución preposicional : Unidad léxica estable formada de dos o más palabras que funcióna («ano pre palabras que funcióna»)
      Обстоятельства этой трагедии до сих пор неясны.

    WordReference Англо-испанский словарь окружать

    окрестности n существительное : Относится к человеку, месту, вещи, качеству и т. д. (окрестности) alrededores nmpl мужское имя во множественном числе : Sustantivo masculino que se usa únicamente во множественном числе, con los artículos los o unos . Ejemplos: los maritations, unos víveres.
      Ребенок пропал без вести, поэтому ее родители обыскали окрестности.
      El niño se había perdido así que sus padres buscaron en los alrededores.
    área Chirtante NF + ADJ
    El Niño Se Había Perdido Así Que Sus Padres Buscaron El área Chingundante.
    окружающий ‘ aparece también en las siguientes entradas:

    В английском описании:

    Испанский:


    .

    Leave a Reply

    Ваш адрес email не будет опубликован.