Оболочки плаценты: Placental microbiota and its role in the development of intra-amniotic infection — Dadayeva

Содержание

Роддом №9 :: Роды

Роды — это сложный физиологический процесс, завершающий беременность, во время которого происходит изгнание плода и последа (плаценты, пуповины и плодных оболочек) из полости матки через родовые пути, успех которых наполовину связан с физиологией и настолько же -с психологическим настроем самой женщины. Физиологические роды наступают по истечении 10 акушерских (9 календарных) месяцев беременности, когда плод становится зрелым и способным к внеутробной жизни. Женщину во время родов называют роженицей, после их окончания — родильницей.

В родах различают три периода: раскрытия шейки матки, изгнания плода и последовый. Период раскрытия шейки матки — от начала регулярных схваток до полного раскрытия шейки матки и излития околоплодных вод -наиболее продолжительный, длится у первородящих в среднем 10-16 ч, а у повторнородящих — 5-9 ч. Схватки вначале слабые, кратковременные, редкие, затем постепенно усиливаются, становятся более продолжительными (до 30-40с) и частыми (через 5-6мин).

Вовремя схватки тело матки, состоящее в основном из продольных мышечных волокон, волнообразно сокращается — в ответ на это шейка матки, в которой преимущественно циркулярные мышечные волокна, отвечает расширением, т.е. раскрывается, тем самым устраняется препятствие на пути плода по родовым путям. В конце первого периода разрываются плодные оболочки и из половых путей изливаются околоплодные воды. В редких случаях плодные оболочки не разрываются, и плод рождается, покрытый ими («в сорочке»).

После полного раскрытия шейки матки и излития околоплодных вод начинается период изгнания плода — это своеобразный праздник для женщины, ведь из пассивного участника она наконец-то превращается в активно действующего. Он продолжается 1-2 ч у первородящих, 5 мин- 1 ч у повторнородящих. Продвижение плода по родовым путям происходит под влиянием сокращений маточной мускулатуры. В этот период к ритмически повторяющимся схваткам, достигающим наибольшей силы и продолжительности, присоединяются сокращения мышц брюшного пресса и диафрагмы — возникают потуги.

В процессе родов плод совершает ряд последовательных и строго определенных движений, облегчающих его рождение. Характер этих движений зависит от положения плода в матке. Обычно он располагается продольно, головкой вниз, при этом над входом в малый таз роженицы чаще находится затылок плода, обращенный вправо или влево (затылочное предлежание плода). В начале периода изгнания плода головка его прижимается к грудке (сгибается), затем, продвигаясь по родовому каналу и поворачиваясь вокруг своей продольной оси, она устанавливается затылком кпереди, а личиком кзади (в сторону крестца роженицы).

Когда головка плода, выходя из полости малого таза, начинает давить на мышцы тазового дна, на прямую кишку и задний проход, роженица ощущает сильные позывы на низ, потуги резко усиливаются и учащаются. Во время потуги головка начинает показываться из половой щели, после окончания потуги головка вновь исчезает (врезывание головки). Вскоре наступает такой момент, когда головка даже в паузах между потугами не исчезает из половой щели (прорезывание головки).

Вначале прорезываются затылок и теменные бугры, затем головка плода разгибается, и рождается ее лицевая часть, обращенная кзади. При следующей потуге родившаяся головка в результате поворота туловища плода поворачивается личиком к правому или левому бедру роженицы. После этого через 1-2 потуги рождаются плечики, туловище и ножки плода. Тотчас после рождения ребенок делает первый вдох и начинает кричать.

После рождения ребенка начинается последовый период родов. В этом периоде, длительность которого у перво- и повторнородящих в среднем 20- 30 мин, плацента отделяется от стенок матки и при натуживании роженицы рождается послед, состоящий из плаценты, пуповины и плодных оболочек. Отделение последа сопровождается небольшим кровотечением.

С окончанием третьего периода начинается послеродовой период, длящийся 6-8 нед. В течение этого периода матка сокращается почти до исходных размеров и постепенно к 4-5-й нед после родов прекращаются выделения из половых путей, которые на 1-й неделе бывают кровянистыми.

Задержание последа у коров: причины, симптомы, лечение и диагностика

После рождения плода у коровы послед, как правило, отделяется в течение 12 часов. Если послед не отделился за это время, необходимо обязательно принять ветеринарные меры. Отсутствие своевременной помощи грозит бактериальным заражением половых органов и организма в целом, хроническим эндометритом, бесплодием.

Почему происходит задержание поcледа?

Послед может полностью или частично задерживаться в родовых путях коровы. Это могут быть плодные оболочки целиком или отдельные плаценты. Эта акушерская патология встречается в среднем у 14,8% коров. Заболевание чревато различными осложнениями (снижение продуктивности, потеря способности воспроизводить потомство), которые при отсутствии своевременной помощи фиксируют у 54–75% особей.

К основным причинам задержания последа у животных относят:

  • атонию и гипотонию матки (слишком слабые схватки после родов или их отсутствие) из-за нарушения обмена веществ;   

  • патологические нарушения в эндометрии, хорионе, в результате чего плаценты матери и теленка сращиваются;   

  • различная инфекция (бруцеллез, вибриоз), которая приводит к повышению тургора карункулов;

  • патологически тяжелые роды с чрезмерным растяжением матки.

Среди факторов риска — погрешности в кормлении (в частности, недостаток кальция) в период стельности, отсутствие достаточного моциона (прогулок), нарушения санитарного режима.

Как определить проблему?

Заметить остатки последа довольно просто — чаще всего красные, серо-красные бугристые плодные оболочки свисают из детородных органов коровы иногда вплоть до скакательных суставов. Либо же послед можно заметить в полости матки при исследовании родовых путей. Чтобы установить проблему, необходимо тщательно осматривать особь в первые часы после родов. Для диагностики проводят пальпацию матки, влагалища, исследуют выделившуюся плаценту.

Симптомы задержания последа

Если задержание все же произошло, но осмотр животного не был произведен своевременно, ветеринара должны насторожить следующие симптомы, которые проявляются в течение суток:

  • корова выгибает спину и тужится, как при мочеиспускании;

  • выглядит угнетенной, отказывается от корма;   

  • у животного повышается температура;  

  • молочная продуктивность резко падает.

Если послед остается в полости матки, но не был своевременно обнаружен, уже на вторые сутки его масса под воздействием бактерий начинает разлагаться с характерным неприятным запахом. Чаще всего возникает эндометрит, вагинит, мастит. Дальнейшее развитие инфекции в организме чревато сепсисом.

Лечение задержания последа у коровы

Для решения проблемы необходимо стимулировать сокращение матки — это позволит последу отделиться. Также нужно защитить организм животного от развития инфекции. В ветеринарии существует множество рекомендаций для данного клинического случая, однако далеко не все они доказали эффективность на практике. NITA-FARM представляет препараты последнего поколения, которые успешно прошли испытания и рекомендованы ведущими ветеринарами РФ для профилактики и лечения задержания последа у коровы. Наши специалисты предлагают применять одно из указанных ниже средств.

  • «Утеротон». В основе этого негормонального препарата — пропранолола гидрохлорид, действие которого направлено на усиление сокращений гладкой мускулатуры матки. Для профилактики задержания последа Утеротон вводят при родах, однократно внутримышечно или внутривенно в дозе 10мл на животное. При обнаружении симптомов задержания последа необходимо внутримышечно или внутривенно ввести лекарство: 3 раза по 10 мл с 12-часовым интервалом. Функциональная активность матки повышается в 2,5–3,3 раза. Плодные оболочки, как правило, отходят в течение 1–4 часов.        

  • «Сепранол». Препарат доказал свою эффективность как средство для профилактики эндометритов. В его основе — хлоргексидин, пропранолол. В составе отсутствуют антибиотики, гормоны. Действующие вещества активно уничтожают патогенную флору и стимулируют активность матки. После завершения выведения плода вводят внутриматочно 2 таблетки препарата однократно. При необходимости повторяют введение через сутки.

  • «Лексофлон». В случае задержания последа с целью уничтожения патогенной микрофлоры в матке, рекомендуется введения антибиотика Лексофлон. В основе этого препарата – левофлоксацин 15%. Вводят в дозе 1мл/30 кг массы тела внутримышечно 3-5 дней подряд.

Информация в данной статье носит рекомендательный характер. Перед применением препарата необходима консультация ветеринарного врача.

Плодные оболочки — это… Что такое Плодные оболочки?

окружают внутриутробно развивающийся организм; к ним относят амнион, гладкий хорион и часть децидуальной (отпадающей) оболочки матки (эндометрия, претерпевшего изменения во время беременности). Вместе с плацентой (Плацента) П. о. образуют плодный пузырь, заполненный околоплодными водами (Околоплодные воды). Развитие П. о. начинается после имплантации зародыша (см. Беременность). Морфология. Амнион (водная оболочка) обращен к плоду. Представляет собой тонкую, но плотную и прочную полупрозрачную мембрану, состоящую из эпителия и соединительнотканной основы. Гладкий хорион располагается между амнионом и децидуальной оболочкой. Он содержит большое количество кровеносных сосудов, особенно в области плаценты, состоит из клеточного и ретикулярного слоев, псевдобазальной мембраны и трофобласта. Последний проникает в глубь прилегающей децидуальной оболочки, обеспечивая тесную связь с ней. Децидуальную оболочку, расположенную между плодным яйцом и миометрием, называют базальной, покрывающую плодное яйцо со стороны полости матки — капсулярной. Капсулярная децидуальная оболочка по мере роста плода истончается и сближается с париетальной децидуальной оболочкой, выстилающей внутреннюю поверхность матки. Децидуальная оболочка содержит большое количество децидуальных клеток (крупных светлых клеток, богатых гликогеном). Схематическое изображение расположения П. о. в матке в конце беременности представлено на рисунке. Функциональное значение. П. о. осуществляют синтез различных веществ, обеспечивают иммунные реакции, необходимые для развития беременности, а также параплацентарный обмен (газообмен, поддержание постоянства состава околоплодных вод и гомеостаза развивающегося организма). Амнион участвует в секреции и резорбции околоплодных вод, выведении продуктов обмена плода. Гладкий хорион выполняет трофическую, дыхательную, выделительную, защитную функции. Предполагают, что трофобласт гладкого хориона продуцирует гормон — хорионический гонадотропин, способствующий сохранению беременности. Децидуальная оболочка выполняет защитную функцию (в т.ч. за счет фагоцитарной активности), играет основную роль в обмене и циркуляции жидкости в системе мать — плод, на ранних стадиях развития зародыша обеспечивает его питание. Плодные оболочки и околоплодные воды играют существенную роль в развитии родовой деятельности. Нижний полюс плодного пузыря, обращенный к шейке матки, удерживает околоплодные воды в процессе беременности и до конца I периода родов. Во время схватки он внедряется во внутренний зев шейки матки, способствуя его раскрытию (см. рис. 1 к ст. Роды). Разрыв П. о. в норме происходит при полном раскрытии шейки матки; излитие околоплодных вод при этом считается своевременным. После рождения плода П. о. изгоняется из полости матки вместе с плацентой и пуповиной (последовый период родов). Методы исследования. Состояние П. о. во время беременности и родов можно определить при влагалищном исследовании путем пальпации, при осмотре с помощью влагалищных зеркал, а также при амниоскопии — осмотре нижнего полюса плодного пузыря с помощью эндоскопического прибора, введенного в канал шейки матки (см. Плод). С целью диагностики генетических заболеваний и пороков развития плода применяют трансцервикальную биопсию хориона. Патология. Чрезмерная плотность П. о., а также плоский плодный пузырь (плотно прилегающий к предлежащей части плода вследствие малого количества передних околоплодных вод) могут приводить к запоздалому разрыву плодных оболочек. В этом случае несмотря на полное раскрытие шейки матки целость П. о. сохраняется. Это приводит к нарушению периода изгнания плода, замедлению его продвижения, создает опасность преждевременной отслойки плаценты и гипоксии плода. Иногда П. о. циркулярно отрываются от плаценты, и плод рождается, покрытый оболочками («в сорочке»). Целость П. о. определяют при пальпации во время влагалищного исследования, в сомнительных случаях при плоском плодном пузыре проводят осмотр с помощью влагалищных зеркал. При запаздывании разрыва П. о. показано их искусственное вскрытие — амниотомия. Прогноз при своевременно проведенной операции благоприятный. Нарушение эластичности или воспалительные изменения П. о. способствуют преждевременному (до начала родовой деятельности) или раннему (в родах до полного раскрытия шейки матки) разрыву П. о. и соответственно преждевременному или раннему излитию околоплодных вод. Если разрыв П. о. произошел не в нижнем полюсе плодного пузыря, а выше, околоплодные воды вытекают медленно. Беременную с преждевременным разрывом П. о. необходимо срочно госпитализировать, т.к. нередко развиваются осложнения: инфицирование П. о. и матки, гипоксия плода, слабость родовой деятельности, затяжное течение родов. В стационаре диагноз уточняют при влагалищном исследовании и (или) путем микроскопии отделяемого из влагалища и отпечатка на предметном стекле с малых половых губ. Лечебная тактика зависит от срока беременности, а при зрелом плоде — от степени готовности к родам (см. Преждевременное излитие околоплодных вод). Ранний разрыв П. о. у рожениц с хорошей родовой деятельностью и вставлением предлежащей части плода во вход в малый таз может не вызывать каких-либо осложнений. Если же излитие околоплодных вод произошло при отсутствии пояса прилегания, возможно выпадение пуповины и мелких частей плода, что осложняет течение родов и представляет большую опасность для плода. При раннем разрыве П. о. могут возникать также слабость родовой деятельности, инфицирование П. о. Разрыв П. о. у рожениц может быть обнаружен пальпаторно при влагалищном исследовании. Лечебная тактика определяется в зависимости от конкретной акушерской ситуации. Воспаление хориона и амниона (хориоамнионит) возникает вследствие инфицирования во время беременности и родов, нередко при преждевременном или раннем излитии околоплодных вод и длительном (более 10 ч) безводном промежутке. Хориоамнионит сопровождается повышением температуры тела до 38° и выше, учащением пульса до 110—120 ударов в 1 мин., появлением гноевидных неприятно пахнущих выделений из половых путей. Нередко развиваются слабость родовой деятельности, гипоксия плода. В послеродовом периоде могут возникать эндометрит (см. Эндомиометрит) и другие инфекционные осложнения (см. Послеродовые заболевания). Лечение заключается в проведении антибактериальной терапии и ускорении родов (с учетом акушерской ситуации). Изменение секреции и резорбции околоплодной жидкости приводит к маловодию или многоводию (см. Околоплодные воды). Возможно возникновение сращений между различными участками амниона, между амнионом и плодом; такие сращения нередко сопутствуют порокам развития плода. Операции. Вскрытие нижнего полюса плодного пузыря (амниотомию) производят с целью родовозбуждения, а также при наличии плотных П. о., низком расположении плаценты, подозрении на частичную отслойку нормально расположенной плаценты, повышении АД в родах и др. Операцию выполняют в асептических условиях с помощью бранши пулевых щипцов (см. Акушерско-гинекологический инструментарий) под контролем пальцев, введенных в канал шейки матки. Амниоцентез (прокол плодных оболочек) через переднюю брюшную стенку или через канал шейки матки осуществляют с целью получения околоплодных вод для исследования, фетоскопии (осмотра плода с помощью специального прибора), введения в полость амниона медикаментозных средств (в т.ч. с целью прерывания беременности). плацента»>

Схематическое изображение расположения плодных оболочек в матке в конце беременности: 1 — базальная децидуальная оболочка, 2 — соприкасающиеся капсулярная и париетальная децидуальные оболочки, 3 — гладкий хорион, 4 — амнион, 5 — плацента.

Плодовые оболочки и плацента ᐉ МЦ БОГОЛЮБЫ

Изменения в трофобласте. В начале второго месяца эмбриогенеза трофобласт имеет большое количество вторичных и третичных ворсинок, которые придают ему лучистый вид. Ворсинки укореняются в мезодерму хорионической пластинки. На протяжении следующих месяцев от уже существующих стволовых ворсинок отрастают многочисленные мелкие веточки в окружающие лакунарные и межворсинчастые пространства. Сначала эти новообразованные ворсинки примитивны, но к началу четвертого месяца клетки цитотрофобласта, а также некоторые соеденительнотканные клетки исчезают. Исчезновение клеток цитотрофобласта начинается от меньших ворсинок и переходит к большим. Хотя некоторые элементы цитотрофобласта остаются в больших ворсинках, они не берут участия в обмене веществ между двумя системами кровообращения.

Ворсинчатый хорион и децидуальная оболочка. На первых неделях развития ворсинки покрывают всю поверхность хориона. По мере прогрессирования беременности ворсинки на эмбриональном полюсе продолжают расти, давая начало ворсинчатому хориону. Ворсинки на противоположном полюсе дегенерируют, и к третьему месяцу здесь образуется гладкий хорион.

Разница в строении эмбрионального и противоположного эмбриональному полюсах отражается также и на структуре децидуальной оболочки, которая является функциональним слоем эндометрия и отторгается при родах. Часть децидуальной оболочки над ворсинчатым хорионом — основная децидуальная оболочка, состоит из компактного слоя больших децидуальных клеток, которые наполнены включениями липидов и гликогена. Децидуальный слой над противоположном эмбриональному полюсе имеет название сумочной децидуальной оболочки. С увеличением размеров хорионического пузыря этот слой растягивается и дегенерирует. Единственной частью хориона, которая принимает участие в процессе обмена веществ, является ворсинчатый хорион, который совместно с децидуальной оболочкой формирует плаценту. Благодаря слиянию амниона и хориона образуется амниохориальная оболочка, которая облитерирует хорионическую полость. Именно эта оболочка и разрывается во время родов.

Структура плаценты

В начале четвертого месяца развития плацента имеет две части: плодовую, образованную ворсинчатым хорионом, и материнскую, образованную децидуальной оболочкой. На протяжении четвертого и пятого месяцев децидуальная оболочка формирует многочисленные децидуальные септы, которые выступают в межворсинчастые пространства, но не достигают хорионической пластинки. В результате развития септ плацента делится на многочисленные компартменты.

Параллельно с продолжением роста плода и расширением матки растет и плацента. Увеличение площади ее поверхности происходит соответственно к увеличению матки, и в конце беременности плацента покрывает приблизительно 15-30% внутренней поверхности матки. Увеличение толщины плаценты обусловлено разветвлением существующих ворсинок, а не дальнейшей пенетрацией в материнские ткани.

В конце беременности плацента имеет дискообразную форму с диаметром 15-25 см, толщиной около 3 см и весом 500-600 г. Во время родов она отрывается от стенки матки и приблизительно через 30 минут после рождения ребенка она выталкивается из полости матки.

Главные функции плаценты

  1. обмен метаболитами и газами между кровью матери и плода;
  2. продукция гормонов.

Обмен газами, такими, как углекислый газ, кислород, окись углерода, происходит путем простой диффузии. Учитывая, что плод поглощает из материнской крови 20-30 мл кислорода ежеминутно, становится понятным, что даже незначительный перерыв в снабжении кислородом будет смертельным для плода. Обмен питательными веществами и электролитами, такими как аминокислоты, свободные жирные кислоты, углеводы и витамины, является интенсивным и возрастает с увеличением срока беременности.

В конце четвертого месяца плацента производит достаточное количество прогестерона для сохранения беременности в случае удаления желтого тела или его функциональной недостаточности. Кроме прогестерона, плацента на протяжении беременности производит нарастающие количества эстрогенов (преимущественно эстриола), которые достигают максимального уровня в конце беременности. Высокие уровни эстрогенов стимулируют рост матки и развитие молочных желез.

Синцитиотрофобласт также производит человеческий хорионический гонадотропин (hCG), действие которого подобно действию лютеинизирующего гормона передней доли гипофиза. Этот гормон выделяется с мочой матери, и его присутствие на ранних стадиях беременности используется как индикатор. Еще один гормон, который производит плацента — соматомаммотропин (плацентарный лактоген). Это вещество подобное гормону росту и обеспечивает для плода приоритетность использования глюкозы из материнской крови, из-за чего для матери в определенной мере служит диабетогенным фактором.

Плацентарный барьер

Большинство материнских гормонов не проходит через плаценту. Степень проникновения других гормонов, таких как тирозин, является невысоким. Значительную опасность составляют некоторые синтетические прогестины, которые проникают сквозь плаценту очень быстро и могут вызвать маскулинизацию плодов женского пола. Еще более опасным является применение синтетического эстрогена диэтилстильбестрола, который легко проходит сквозь плаценту. Это вещество вызывает рак влагалища и аномалии яичек у индивидов, которые поддавались его действию во время внутриутробного развития.

Хотя плацентарный барьер часто считают защитой от повреждающего действия факторов внешней среды, много вирусов, таких как вирусы краснухи, цитомегаловирус, Коксаки, оспы, ветряной оспы, кори, полиомиелита без труда проходят сквозь плаценту. Попадая внутрь плода, некоторые вирусы вызывают болезни, которые в свою очередь могут привести к гибели клеток и врожденных пороков. К сожалению и большинство лекарств и их метаболитов проникают сквозь плаценту и многие из них вызывают серьезные повреждения у плода.

Мембрана плода — обзор

Мембрана плода

Мембраны плода — это внеэмбриональные ткани, генетически идентичные плоду, которые окружают плод и образуют интерфейс матери и плода. Среди позвоночных представлены различные морфологические типы плодных оболочек. У людей плодные оболочки в срок имеют площадь примерно 1000–1200 см 2 , где 30% покрывают плаценту, а остальные 70% взаимодействуют с тканями матери. Поддержание целостности плодных оболочек имеет решающее значение для успеха беременности, когда достаточная прочность и эластичность тканей позволяет ткани увеличиваться в размере вдвое и поддерживать энергичные движения плода, особенно к концу беременности.Мембраны плода состоят из нескольких типов клеток, включая эпителиальные, мезенхимальные и трофобласты, которые встроены во внеклеточный матрикс, придающий прочность на разрыв. Оболочки плода представляют собой многослойные ткани, образованные двумя основными слоями: амнионом и хорионом. Амнион находится в прямом контакте с плодом и состоит из пяти различных слоев: одного слоя эпителиальных клеток, базальной мембраны, компактного слоя, слоя фибробластов и промежуточного или губчатого слоя. Хорион состоит из слоя соединительной ткани, базальной мембраны и области, содержащей трофобласты, которые, по определению, прочно прикреплены к материнской децидуальной ткани (Bryant-Greenwood, 1998).Децидуальная оболочка, материнская ткань, обсуждаемая ниже, состоит из дифференцированных стромальных клеток, окруженных внеклеточным матриксом, который сливается с хорионом в течение беременности. Коллагены являются основными структурными компонентами плодных оболочек, где основная прочность на разрыв обеспечивается интерстициальным коллагеном типов I и III, а также меньшими количествами типов V, VI и VII. Структурная целостность плодных оболочек обусловлена ​​точным балансом синтеза и деградации коллагенов.

Оболочки плода претерпевают физические и биохимические изменения в процессе нормальных родов, включая повышение коллагенолитической активности и апоптоз, способствующие потере структуры, что приводит к разрыву оболочек, необходимых для доставки плода (Вадилло-Ортега и Эстрада-Гутьеррес , 2005). Кроме того, во время родов внутри плодных оболочек создается воспалительная микросреда, характеризующаяся наличием определенных подгрупп лейкоцитов и секрецией аутокринных и паракринных медиаторов.Хориодецидуальные клетки и инфильтрованные лейкоциты секретируют провоспалительные цитокины, простагландины и матриксные металлопротеазы во время начала родов, что может привести к самопроизвольным родам, разрыву оболочек и, в конечном итоге, к рождению плода (Gomez-Lopez et al., 2013, Cleaton et al., 2014)

Оболочки плода у людей не васкуляризированы, что ограничивает их функцию поверхности обмена питательными веществами между матерью и плодом. Однако стероиды и простагландины секретируются оболочками плода, обеспечивая паракринную передачу сигналов между компартментами матери и плода.Глюкокортикоиды участвуют в созревании плода и начале родов (Myatt and Sun, 2010). Кроме того, плодные оболочки могут синтезировать, хранить и секретировать широкий спектр цитокинов, которые могут регулировать и инициировать местные воспалительные реакции, которые, как считается, участвуют в физиологии нормальных родов и в патологии преждевременных родов, связанной с внутриутробной инфекцией (Chavatte-Palmer and Tarrade, 2016). Интерфейс матери и плода плодных оболочек — это уникальное место, которое требует модуляции местного иммунного ответа на аллогенный плод при поддержании защитного барьера против инфекционных агентов.В нескольких отчетах оценивалась реакция мембран плода человека на целые бактерии и их продукты с использованием моделей in vitro для исследования внутриутробной инфекции. Мембраны плода способны реагировать на бактериальные продукты, секретируя провоспалительные цитокины, такие как IL-1β, TNF-α и IL-6. Клетки эпителия амниона реагируют на инфекцию, секретируя IL-6 и IL-L8. Модели in vitro предполагают, что при наличии инфекции механизмы, приводящие к разрыву плодных оболочек, по-видимому, зависят от природы инфицирующего микроорганизма (Di Simone et al., 2009).

Строение, функция и передача лекарств плаценты | BJA Education

  • Плацента — это интерфейс между матерью и плодом.

  • Функции плаценты включают газообмен, обмен веществ, секрецию гормонов и защиту плода.

  • Перенос питательных веществ и лекарств через плаценту осуществляется путем пассивной диффузии, облегченной диффузии, активного транспорта и пиноцитоза.

  • Перенос лекарства через плаценту зависит от физических свойств плацентарной оболочки и фармакологических свойств лекарства.

  • Почти все анестетики легко проникают через плаценту, за исключением нервно-мышечных блокаторов.

Плацента человека — сложный орган, который действует как интерфейс между матерью и плодом. Его функции: В конце 1950-х — начале 1960-х годов разрушительная серия врожденных дефектов, вызванных талидомидом, повысила осведомленность о несовершенном состоянии плаценты как о препятствии для передачи лекарств. Последующие исследования были направлены на выяснение точной природы и механизмов трансплацентарного проникновения лекарств.Также растет интерес к преднамеренному использованию назначаемых матерью лекарств, предназначенных для проникновения через плаценту и оказания терапевтического воздействия на плод.

  • газообмен и перенос питательных веществ и продуктов жизнедеятельности между плазмой матери и плода;

  • передача иммунитета путем передачи иммуноглобулинов от матери к плоду;

  • секреция гормонов, важных для роста и развития плода.

В этой статье рассматривается структура и основные функции плаценты. В нем также обобщается наше текущее понимание передачи лекарств через плаценту, особенно лекарств, используемых для анестезии и обезболивания во время беременности.

Структура плаценты

Плацента — это дискообразный орган, который обеспечивает единственную физическую связь между матерью и плодом. Во время беременности плацента разрастается, обеспечивая все большую площадь поверхности для обмена между плодами и матерями.В срок плацента весит почти 500 г, имеет диаметр 15–20 см, толщину 2–3 см и площадь поверхности почти 15 м 2 . 1

Основной структурной единицей плаценты является ворсинка хориона. Ворсинки представляют собой сосудистые выступы ткани плода, окруженные хорионом. Хорион состоит из двух клеточных слоев: внешнего синцитиотрофобласта, который находится в прямом контакте с материнской кровью в межворсинчатом пространстве, и внутреннего цитотрофобласта. Межворсинчатое пространство — это большое пещеристое пространство, в которое проникают ворсинки. 2 По мере созревания ворсинок наблюдается заметное уменьшение компонента цитотрофобласта, так что в срок только один слой синцитиотрофобласта разделяет материнскую кровь и эндотелий капилляров плода. 3

Материнское кровоснабжение матки осуществляется через маточные и яичниковые артерии, которые образуют дугообразные артерии и от которых лучевые артерии проникают в миометрий. Затем лучевые артерии делятся на спиральные артерии, которые снабжают межворсинчатое пространство, омывая ворсинки хориона материнской кровью.Давление составляет около 80–100 мм рт. Ст. В маточных артериях, 70 мм рт. Ст. В спиральных артериях и только 10 мм рт. Ст. В межворсинчатом пространстве. Две пупочные артерии, отходящие от внутренних подвздошных артерий плода, несут дезоксигенированную кровь плода через пуповину к плаценте. Пупочные артерии делятся на хорионические артерии и заканчиваются капиллярами внутри ворсинок. Вещества материнской крови проходят из межворсинчатого пространства через синцитиотрофобласт, соединительную ткань плода и эндотелий капилляров плода в кровь плода.Капилляры плода впадают в хориональные вены, которые впадают в единственную пупочную вену 2 (рис. 1).

Рис. 1

Схематический рисунок поперечного сечения доношенной плаценты [воспроизведено из The Developing Human: Clinical Oriented Embryology (8th Edn) K.L. Мур и Т. Persaud 1 с любезного разрешения Elsevier Inc.].

Рис. 1

Схематическое изображение поперечного сечения доношенной плаценты [воспроизведено из «Развивающийся человек: клинически ориентированная эмбриология» (8-е изд.) К. Л. Мур и Т.В.Н. Persaud 1 с любезного разрешения Elsevier Inc.].

Материнский маточный кровоток при доношении составляет ∼600 мл мин. −1 , 80% которого переходит в плаценту. В маточно-плацентарной циркуляции отсутствует ауторегуляция, и поэтому кровоток напрямую связан со средним давлением перфузии матки и обратно пропорционален сопротивлению сосудов матки. Следовательно, кровоток в маточно-плацентарной системе кровообращения может быть снижен из-за гипотонии матери и повышения маточного давления во время сокращений матки.Поскольку маточно-плацентарные артерии содержат α-адренорецепторы, симпатическая стимуляция (например, вазопрессорными препаратами) может привести к сужению сосудов маточной артерии. 2

Функции плаценты

Газовая биржа

Легкие плода не участвуют в газообмене, пока находится в утробе матери , поэтому плацента полностью отвечает за перенос кислорода и углекислого газа к и от развивающегося плода.

Кислород

Кислород — это небольшая молекула, которая легко проникает через плаценту путем пассивной диффузии.Перенос кислорода в основном зависит от градиента парциального давления кислорода между материнской кровью в межворсинчатом пространстве и кровью плода в пупочных артериях (~ 4 кПа).

Перенос кислорода к плоду усиливается эффектом Бора. На границе раздела матери и плода материнская кровь поглощает углекислый газ и становится более ацидозной. Это вызывает сдвиг кривой диссоциации материнского оксигемоглобина вправо, что способствует высвобождению кислорода у плода. В то же время кровь плода выделяет углекислый газ и становится более щелочной.Это приводит к смещению кривой плода влево, что способствует усвоению кислородом плода. Это явление называется «двойным эффектом Бора». Передаче кислорода от матери к плоду также способствует наличие гемоглобина плода, который сдвигает кривую диссоциации оксигемоглобина плода дальше влево. 3

Двуокись углерода

Углекислый газ также легко проникает через плаценту путем пассивной диффузии. Передача от плода к матери зависит главным образом от градиента парциального давления углекислого газа между кровью плода в пупочных артериях и кровью матери в межворсинчатом пространстве (∼1.8 кПа).

Передаче диоксида углерода от плода к матери способствует эффект Холдейна (повышенная способность деоксигенированной крови переносить диоксид углерода по сравнению с оксигенированной кровью). Поскольку материнская кровь выделяет кислород (вырабатывая дезоксигемоглобин), она может переносить больше углекислого газа в виде бикарбоната и карбаминогемоглобина. В то же время, поскольку кровь плода поглощает кислород для образования оксигемоглобина, она имеет пониженное сродство к углекислому газу и, следовательно, выделяет углекислый газ матери.Комбинация этих двух событий называется «двойным эффектом Холдейна». 3

Метаболический перенос

Глюкоза

У плода очень низкая способность к глюконеогенезу, поэтому материнская глюкоза является его основным источником энергии. Пассивной диффузии глюкозы через плаценту недостаточно для удовлетворения потребностей плода, поэтому требуется облегченная диффузия с использованием различных переносчиков глюкозы. 4,5

Аминокислоты

Аминокислоты для синтеза белка плода передаются от матери к плоду посредством активного транспорта.Существует несколько белков-переносчиков, специфичных для анионных, катионных и нейтральных аминокислот. Многие из этих белков совместно транспортируют аминокислоты с натрием: транспорт натрия вниз по градиенту концентрации увлекает аминокислоты в клетки. 4,5

Жирные кислоты

Жирные кислоты важны для синтеза соединений, участвующих в передаче сигналов клеток (например, простагландинов и лейкотриенов), а также для производства фосфолипидов плода, биологических мембран и миелина. Липопротеинлипаза, фермент, расщепляющий липопротеины на свободные жирные кислоты, находится на материнской поверхности плаценты. 4 Свободные жирные кислоты и глицерин передаются от матери к плоду в основном путем простой диффузии, но также с использованием белков, связывающих жирные кислоты. 4,5

Электролиты, витамины и вода

Ионы натрия и хлора в основном переносятся через плаценту путем пассивной диффузии, хотя активный транспорт может иметь значение.Ионы кальция, железа и витаминов переносятся активным транспортом, опосредованным переносчиками. Вода перемещается путем простой диффузии в соответствии с градиентами гидростатического и осмотического давления. Определенные белки водных каналов в трофобласте могут способствовать его прохождению. 6

Эндокринная функция

Плацента — это эндокринный орган, вырабатывающий ряд важных пептидных и стероидных гормонов.

Хорионический гонадотропин человека

Хорионический гонадотропин человека (ХГЧ) — это гликопротеиновый гормон, вырабатываемый синцитиотрофобластом на ранних сроках беременности.Пик продуктивности наступает примерно на 8 неделе беременности. ХГЧ стимулирует желтое тело к секреции прогестерона, который необходим для поддержания жизнеспособности беременности. 6 Определение ХГЧ в моче составляет основу коммерческих наборов для тестирования на беременность.

Плацентарный лактоген человека

Человеческий плацентарный лактоген (HPL) также продуцируется синцитиотрофобластом. Он снижает чувствительность к инсулину матери, что приводит к повышению уровня глюкозы в крови матери.Он стимулирует выработку легочного сурфактанта плода и синтез адренокортикотрофных гормонов, а также способствует развитию материнской груди для производства молока. 6 HPL превращает мать из основного потребителя углеводов в потребителя жирных кислот, тем самым экономя глюкозу для плода.

Вариант гормона роста человека

Вариант гормона роста человека вырабатывается синцитиотрофобластом и влияет на рост самой плаценты.Он также стимулирует материнский глюконеогенез и липолиз, оптимизируя доступность питательных веществ для развивающегося плода. 6

Эстрогены и прогестерон

До конца восьмой недели беременности желтое тело выделяет прогестерон. Плацента постепенно берет на себя эту роль, и производство прогестерона увеличивается непосредственно перед родами. Прогестерон важен для предотвращения сокращений матки и начала родов.Эстрогены стимулируют рост матки и развитие молочных желез.

Иммунологическая функция

Хотя большинство белков слишком велики для преодоления плацентарного барьера, материнские IgG-антитела могут переходить от матери к плоду путем пиноцитоза, обеспечивая пассивный иммунитет в первые несколько месяцев жизни. Синцитиотрофобласт обладает рецепторами для Fc-фрагментов IgG; связанный IgG затем подвергается эндоцитозу в везикулу перед высвобождением путем экзоцитоза в кровь плода. 2 Этот перенос начинается на ранних сроках беременности и экспоненциально увеличивается в третьем триместре. 7 Антитела, вызывающие аутоиммунные нарушения у матери (например, миастению), также могут проникать через плаценту и поражать плод. 2

Плацентарный перенос лекарств

Почти все лекарства в конечном итоге проникают через плаценту и достигают плода. В некоторых случаях этот трансплацентарный перенос может быть полезным, и матери могут намеренно вводить лекарства для лечения определенных состояний плода.Например, матери могут быть назначены стероиды для ускорения созревания легких плода, а сердечные препараты могут быть назначены для контроля аритмий плода.

Однако трансплацентарный перенос лекарств может также оказывать пагубное воздействие на плод, включая тератогенность или нарушение роста и развития плода. Наибольший риск неблагоприятного воздействия лекарств на плод, вероятно, связан с органогенезом, который происходит в первом триместре. Воздействие лекарств на плод может быть прямым или опосредованным через изменение маточно-плацентарного кровотока.

Различают три типа передачи лекарств через плаценту: 8

  • Полный перенос (препараты типа 1): например, тиопентал

  • Превышение передачи (препараты типа 2): например, кетамин

  • Неполный перенос (препараты 3 типа): например, сукцинилхолин

Механизмы передачи лекарств

Лекарства, которые переходят из материнской крови в кровь плода, должны переноситься в межворсинчатое пространство и проходить через синцитиотрофобласт, соединительную ткань плода и эндотелий капилляров плода.Ограничивающим скорость барьером для переноса лекарства через плаценту является слой клеток синцитиотрофобласта, покрывающий ворсинки. Факторы, влияющие на перенос лекарств через плаценту, перечислены в таблице 1.

Таблица 1

Сводка факторов, влияющих на перенос лекарств через плаценту

902 902 плацента
Физическая
Площадь поверхности плаценты
Толщина плаценты
pH крови матери и плода
Маточно-плацентарный кровоток
Наличие плацентарных переносчиков лекарств
Фармакологический
Молекулярный вес лекарственного средства
Растворимость липидов
Связывание
Физическая
Площадь поверхности плаценты
Толщина плаценты
pH крови матери и плода
Плацентарный метаболизм
Маточно-плацентарный кровоток
Наличие плацентарных переносчиков лекарств
Фармакологический
Молекулярная масса лекарственного средства
902 902 Связывание липидов 902
Градиент концентрации через плаценту
Таблица 1

Сводка факторов, влияющих на перенос лекарственного средства через плаценту

Физический
Площадь поверхности плаценты
Толщина плаценты кровь
Плацентарный метаболизм
Маточно-плацентарный кровоток
Наличие плацентарных переносчиков лекарственных средств
Фармакологический
Молекул Вес препарата
Растворимость в липидах
pKa
Связывание с белками
Градиент концентрации через плаценту
Плацентарная поверхность
Физическая площадь толщина
pH крови матери и плода
Плацентарный метаболизм
Маточно-плацентарный кровоток
Наличие плацентарных переносчиков лекарств
902 Фармакологический вес
902 Фармакологический препарат
902 Фармакологический вес Растворимость липидов
pKa
Связывание с белками
Градиент концентрации через плаценту

Существует четыре основных механизма переноса лекарственного средства через плаценту ta 9 (рис. 2).

Рис. 2

Диаграмма, показывающая механизмы плацентарного переноса лекарств (а — простая диффузия; б — облегченная диффузия с использованием носителя; в — активный транспорт с использованием АТФ; г — пиноцитоз; БМ — базальная мембрана синцитиотрофобласта; МВМ — микроворсинки мембраны синцитиотрофобласт) (адаптировано из диаграммы в Desforges and Sibley 4 с любезного разрешения Международного журнала биологии развития ).

Рис. 2

Диаграмма, показывающая механизмы плацентарного переноса лекарств (а — простая диффузия; б — облегченная диффузия с использованием носителя; в — активный транспорт с использованием АТФ; г — пиноцитоз; BM — базальная мембрана синцитиотрофобласта; MVM — микроворсинчатая мембрана. синцитиотрофобласта) (адаптировано из диаграммы в Desforges and Sibley 4 с любезного разрешения International Journal of Developmental Biology ).

Простая диффузия
: например мидазолам и парацетамол

Большинство лекарств (особенно препаратов типа 1) проникают через плаценту по этому механизму. Передача осуществляется либо трансцеллюлярно через слой синцитиотрофобластов, либо параклеточно через водные каналы, встроенные в мембрану. 10 Распространение не требует ввода энергии, но зависит от градиента концентрации через плаценту, при этом лекарство пассивно перемещается из областей с высокой концентрацией в область низкой.

Передача лекарств, которые пассивно диффундируют от матери к плоду, регулируется законом диффузии Фика. 3 Здесь указано, что скорость диффузии в единицу времени прямо пропорциональна площади поверхности мембраны (плаценты) и градиенту концентрации на ней, и обратно пропорциональна толщине мембраны: где Q — скорость диффузии лекарства через плаценту в единицу времени, k константа диффузии, SA площадь поверхности плацентарной мембраны, C 1 материнская концентрация свободного лекарства, C 2 концентрация свободного лекарства у плода , а d толщину плацентарной оболочки.

В нормальной плаценте площадь ворсинок и приток крови к плаценте увеличиваются во время беременности. Плацентарные оболочки также истончаются, и слой цитотрофобласта практически полностью исчезает. Эти изменения увеличивают пассивную диффузию лекарств и питательных веществ к растущему плоду. Инфекционные процессы, поражающие плаценту, могут привести к увеличению толщины мембран плаценты, что уменьшит пассивную диффузию через них.

Константа диффузии, k , включает различные физико-химические свойства лекарственного средства.К ним относятся:

  • Молекулярная масса

    Лекарства с молекулярной массой <500 Да легко диффундируют через плаценту. Большинство препаратов, используемых в анестезиологической практике, имеют молекулярную массу <500 Да.

  • Растворимость липидов

    Липофильные молекулы легко диффундируют через липидные мембраны, одной из которых является плацента.

  • Степень ионизации

    Только неионизированная фракция частично ионизированного лекарства проникает через плацентарную мембрану. Степень ионизации лекарства зависит от его pKa и pH материнской крови. Большинство препаратов, используемых в анестезиологической практике, плохо ионизируются в крови и поэтому легко проникают через плаценту. Исключением являются нервно-мышечные блокаторы, которые сильно ионизированы и поэтому их перенос незначителен. Если pH материнской крови изменяется (например, во время родов), то может произойти изменение степени ионизации и переноса лекарства.

  • Связывание с белками

    Лекарства, которые связываются с белками, не проникают через плаценту; только свободная, несвязанная часть лекарства может свободно пересекать клеточные мембраны.Связывание с белками изменяется при ряде патологических состояний. Например, низкий уровень сывороточного альбумина при преэклампсии приведет к увеличению доли несвязанного лекарства и, следовательно, будет способствовать переносу лекарства через плаценту.

Облегченная диффузия: например, цефалоспорины и глюкокортикоиды

Лекарства, структурно связанные с эндогенными соединениями, часто переносятся путем облегченной диффузии. Этот вид транспорта нуждается в веществе-носителе внутри плаценты, чтобы облегчить перенос через нее.Опять же, подвод энергии не требуется, поскольку перенос лекарства происходит вниз по градиенту концентрации. Облегченная диффузия будет подавлена, если молекулы носителя станут насыщенными как лекарством, так и эндогенными субстратами, конкурирующими за их использование. 8

Активный транспорт: например, норадреналин и дофамин

Активный транспорт использует энергию, обычно в форме АТФ, для транспортировки веществ против концентрации или электрохимического градиента. Транспорт опосредуется переносчиками и насыщается, и между родственными молекулами существует конкуренция.Активные переносчики лекарств расположены как на материнской, так и на фетальной сторонах плацентарных оболочек и могут транспортировать лекарства от матери к плоду и наоборот.

В плаценте был идентифицирован широкий спектр активных переносчиков, включая р-гликопротеин (участвующий в переносе лекарственных препаратов, включая дигоксин, дексаметазон, циклоспорин А и химиотерапевтические агенты, такие как винкристин и винбластин) и белки множественной лекарственной устойчивости 1– 3 (участвует в передаче таких препаратов, как метотрексат и ингибиторы протеазы ВИЧ). 8,11 Экспрессия и распределение переносчиков лекарств в плаценте могут варьироваться в зависимости от беременности.

Пиноцитоз

При пиноцитозе лекарства полностью проникают в инвагинации мембраны, а затем высвобождаются на другой стороне клетки. Очень мало известно об этом способе передачи и о лекарствах, которые проникают через плаценту с помощью этого механизма.

Перенос анестетиков через плаценту

Индукционные агенты

Тиопентал — это наиболее часто используемое индукционное средство у рожениц.Это очень липидорастворимая слабая кислота, которая на 61% неионизирована при pH плазмы и на 75% связана с альбумином плазмы. Он быстро проникает через плаценту и быстро выводится новорожденным после родов. 12 Пропофол также хорошо растворяется в жирах и может легко проникать через плаценту. Это было связано с преходящей депрессией по шкале Апгар и нейроповеденческими эффектами у новорожденных.

Ингаляционные агенты

Летучие анестетики легко проникают через плаценту, поскольку они хорошо растворимы в липидах и имеют низкий молекулярный вес.Увеличенный интервал между введением дозы приводит к большему переносу и, следовательно, большему седативному эффекту на новорожденного. Закись азота также быстро проникает через плаценту. У новорожденных, подвергшихся воздействию закиси азота непосредственно перед родами, может возникнуть диффузная гипоксия, поэтому может потребоваться дополнительный кислород.

Нервно-мышечные блокаторы

Нервно-мышечные блокаторы представляют собой большие, плохо растворимые в липидах и высокоионизированные молекулы. Они проникают через плаценту очень медленно и не представляют серьезных клинических проблем для новорожденного. 13

Опиоиды

Все опиоиды в значительных количествах проникают через плаценту. Меперидин обычно используется во время родов. Он на 50% связан с белками плазмы и легко проникает через плаценту. Максимальное поглощение тканями плода происходит через 2–3 часа после внутримышечной инъекции матери. доза, и это время, когда неонатальное угнетение дыхания наиболее вероятно. Вредные эффекты могут длиться 72 часа или более после родов и объясняются увеличенным периодом полувыведения как меперидина, так и его метаболита, нормеперидина, у новорожденных. 14 Морфин менее растворим в липидах, но из-за плохого связывания с белками он легко проникает через плаценту. Фентанил очень жирорастворим и быстро проникает через плаценту. Ремифентанил проникает через плаценту, но быстро метаболизируется плодом, и его использование для обезболивания родов не было связано с неблагоприятными эффектами у новорожденных.

Местные анестетики

Чтобы местные анестетики, вводимые эпидурально, воздействовали на плод, они должны абсорбироваться в системный кровоток до переноса через плаценту. Местные анестетики являются слабыми основаниями и имеют относительно низкую степень ионизации при физиологическом pH. Бупивакаин и ропивакаин хорошо растворимы в липидах, но обладают высокой степенью связывания с белками. Некоторая системная абсорбция происходит через большие эпидуральные венозные сплетения с последующим переносом через плаценту путем простой диффузии. Лидокаин менее растворим в липидах, чем бупивакаин, но имеет более низкую степень связывания с белками, поэтому он также проникает через плаценту.

Местные анестетики могут накапливаться в плоде из-за «захвата ионов», если плод становится ацидозом.Улавливание ионов происходит, когда пониженный уровень pH у плода приводит к увеличению доли ионизированного лекарственного средства, которое затем не может проникать через плаценту. 3

Антихолинергические средства

Перенос антихолинергических препаратов через плаценту имитирует перенос этих препаратов через гематоэнцефалический барьер. Гликопирролат представляет собой соединение четвертичного аммония, которое полностью ионизировано и поэтому плохо переносится через плаценту. Атропин представляет собой жирорастворимый третичный амин, который демонстрирует полный плацентарный перенос. 15

Неостигмин

Неостигмин представляет собой соединение четвертичного аммония, но представляет собой небольшую молекулу, которая способна проникать через плаценту быстрее, чем гликопирролат. 13 В нескольких случаях, когда неостигмин использовался с гликопирролатом для устранения недеполяризующей нервно-мышечной блокады во время беременности, сообщалось о глубокой брадикардии плода. 13,15 Следовательно, для общей анестезии во время беременности, когда ребенок должен оставаться в утробе матери , может быть рекомендовано использовать неостигмин с атропином, а не с гликопирролатом.

Бензодиазепины

Бензодиазепины хорошо растворимы в липидах, неионизированы и поэтому быстро и полностью диффундируют через плаценту.

Вазоактивные препараты

Симпатомиметики, такие как эфедрин и фенилэфрин, обычно используются для лечения гипотонии у матери во время регионарной анестезии. Эфедрин увеличивает материнское артериальное давление в основном за счет увеличения сердечного выброса через сердечные β-1 рецепторы, с меньшим вкладом за счет сужения сосудов через стимуляцию α-1 рецепторов.Он минимально влияет на маточно-плацентарный кровоток. Он легко проникает через плаценту и, как было показано, связан со снижением pH пупочной артерии, вероятно, за счет стимуляции увеличения скорости метаболизма плода. Фенилэфрин увеличивает артериальное давление у матери за счет сужения сосудов за счет прямого воздействия на рецепторы α-1. Было показано, что он предотвращает материнскую гипотензию, не вызывая ацидоза плода, в сочетании с быстрой инфузией кристаллоидов сразу после инъекции спинномозгового анестетика. 16

Резюме

Плацента — замечательный орган, который играет жизненно важную роль в обеспечении удовлетворительного роста и развития плода. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы лучше понять молекулярные механизмы трансплацентарного переноса лекарств и то, как лекарства могут влиять на здоровье и благополучие плода.

Декларация интересов

Не объявлено.

Список литературы

1,.

Плацента и оболочки плода

,

Развивающийся человек: клинически ориентированная эмбриология

,

2008

Филадельфия

Saunders Elsevier Inc.

(стр.

110

44

) 2,.

Физиология матери и новорожденного

,

Принципы физиологии для анестезиолога

,

2011

Лондон

Арнольд

(стр.

345

64

) 3. ,,.

Физиология беременности

,

Основы анестезии

,

2002

Лондон: Greenwich Medical Media Ltd

(стр.

511

27

) 4,.

Подача питательных веществ через плаценту и рост плода

,

Int J Dev Biol

,

2010

, vol.

54

(стр.

377

90

) 5,,.

Транспорт питательных веществ через плаценту

,

Adv Drug Deliv Rev

,

1999

, vol.

38

(стр.

41

58

) 6,,,.

Рост и функция нормальной плаценты человека

,

Thromb Res

,

2004

, vol.

114

(стр.

397

407

) 7.

Роль антител IgG в связи с функцией плаценты и иммунологическими заболеваниями при беременности человека

,

Expert Rev Clin Immunol

,

2013

, vol.

9

(стр.

235

49

) 8,.

Плацентарный перенос лекарств, вводимых матери

,

Clin Pharmacokinet

,

1995

, vol.

28

(стр.

235

69

) 9,,,,.

Механизмы переноса лекарств через плаценту

,

Pharm World Sci

,

1998

, vol.

20

(стр.

139

48

) 10.

Контроль доставки лекарств через плаценту

,

Eur J Pharm Sci

,

1999

, vol.

8

(стр.

161

5

) 11,,,,.

Транспорт лекарств через плаценту

,

Curr Pharm Biotechnol

,

2011

, vol.

12

(стр.

707

14

) 12,,.

Сравнение пропофола и тиопентона для индукции наркоза при плановом кесаревом сечении

,

Анестезия

,

1989

, vol.

44

(стр.

758

62

) 13.

Перенос лекарств через плаценту

,

Trophoblast Res

,

1998

, vol.

12

(стр.

239

55

) 14.

Обезболивание родов и ребенок: хорошие новости — это не новости

,

Int J Obstet Anesth

,

2011

, vol.

20

(стр.

38

50

) 15,,.

Неостигмин, атропин и гликопирролат: проникает ли неостигмин через плаценту?

,

Анестезиология

,

1996

, т.

84

(стр.

450

2

) 16,,.

Профилактика гипотензии во время спинальной анестезии при кесаревом сечении: эффективный метод с использованием комбинации инфузии фенилэфрина и когидратации кристаллоидов

,

Анестезиология

,

2005

, vol.

103

(стр.

744

50

)

© Автор [2014]. Опубликовано Oxford University Press от имени Британского журнала анестезии. Все права защищены. Для получения разрешений обращайтесь по электронной почте: [email protected]

.

Профилактика антибиотиками при рваных оболочках плаценты: проспективное многоцентровое рандомизированное исследование | BMC по беременности и родам

Это открытое проспективное многоцентровое рандомизированное исследование.Три больницы в Сараваке, где действующий местный протокол предусматривал профилактическое введение амоксициллин-клавулановой кислоты, служили местами набора. Соответствующие критериям женщины были рандомизированы для получения либо профилактики в рамках существующего протокола (контроль), либо отсутствия профилактики (вмешательства). Обе группы женщин получили медицинские консультации относительно симптомов эндометрита, как подробно описано ниже. Никаких изменений в дозе, времени или способе введения предполагаемого лекарства для группы профилактики не производилось.

Для участия в исследовании были приглашены женщины, родившие естественным путем более 24 + 0 недель беременности и у которых были обнаружены рваные плацентарные оболочки. Это было определено как плацентарные оболочки, которые воспринимались акушером как неполное удаление во время третьего периода родов, в отличие от доставки мембран вместе с основной массой плаценты. Внешний вид может включать неровные, зубчатые края мембран при осмотре и обычно, но не всегда, связан с частями мембраны, требующими эвакуации из зева шейки матки (рис.1 и 2). Если полнота плацентарных оболочек вызывала сомнения, обращались за консультацией к другому, более опытному акушеру.

Рис. 1

Осмотр плацентарной поверхности плаценты. Рваные оболочки были эвакуированы отдельно и показаны в верхнем правом углу.

Рис. 2

Исследование материнской поверхности плаценты. Рваные оболочки были эвакуированы отдельно и показаны в верхнем правом углу.

У всех женщин, у которых были диагностированы рваные оболочки плаценты, была предпринята попытка немедленного прикроватного удаления пальцев из расширенного зева шейки матки.Независимо от количества удаленных плодных оболочек диагноз остается неизменным. Однако, если возникало подозрение, что был сохранен целый слой хориональной или амниотической оболочки, регистрировалась формальная оценка регистратора родильного отделения.

Критерии исключения были следующие:

  1. а)

    Лихорадка в течение 5 дней до родов (подмышечная температура> 37,5 ° C в 2 или более случаях с интервалом не менее 1 часа или температура> 38 ° C в одном случае).Сюда также входит лихорадка во время родов

  2. б)

    Необходимые пероральные или внутривенные антибиотики по любым другим акушерским причинам (например, слезы третьей или четвертой степени, преждевременный разрыв плодных оболочек) или неакушерских (например, пневмония, острый пиелонефрит)

  3. в)

    Задержка плаценты

  4. г)

    Длительный разрыв мембраны (> 18 ч)

  5. д)

    Ретровирусное заболевание, при длительном приеме пероральных или парентеральных стероидов или при получении других форм иммунодепрессантов, включая химиотерапию, в течение последнего года

  6. е)

    Роды при внутриутробной смерти через естественные родовые пути

  7. грамм)

    Аллергия на пенициллин

Набор проводился в трудовых коллективах соответствующих больниц, примерно через час после родов и ремонта промежности. Как и в настоящее время, матерей регулярно консультировали относительно тревожных симптомов, указывающих на эндометрит, таких как боли внизу живота, увеличивающееся выпадение лохий и лихорадка. Информационный буклет для пациентов на английском или малайском языках был предоставлен до того, как они были переведены из родильного отделения. В течение 6–8 часов исследователи связались со вторым контактным лицом, чтобы подтвердить свою заинтересованность в участии. Письменное информированное согласие было получено от женщин, которые согласились участвовать, перед случайным распределением их в соотношении 1: 1 (группа профилактики или группа без профилактики) путем блочной рандомизации (размер блока 10), стратифицированных по сайту набора, с использованием сети программа рандомизации.

Женщины, включенные в группу профилактики, получали недельный курс таблеток амоксициллин-клавулановой кислоты 625 мг три раза в день, при этом первая доза вводилась в течение 6-8 часов после родов. Был предоставлен дневник пациентов, чтобы повысить их приверженность к лечению. Это открытое испытание, в котором не использовалось плацебо. Автор, выполняющий анализ (VHY), не участвовал в вербовке и оставался слепым в отношении назначенного оружия. Женщины, отказавшиеся от участия, будут исключены из испытания и получат профилактику в соответствии с местным протоколом и проинформированы о тревожных симптомах эндометрита.

После выписки авторы провели дополнительные телефонные звонки через 2 и 6 недель после родов. Будет разъяснено соблюдение режима приема лекарств, их прекращение и побочные эффекты. Были изучены симптомы эндометрита, и, если они есть, женщины были осмотрены в течение 24 часов в акушерском отделении соответствующих больниц. Последующий телефонный звонок также позволит выявить любую госпитализацию по поводу эндометрита у этих женщин, если они будут госпитализированы в больницы, отличные от тех, которые участвовали в приеме на работу.

Послеродовой эндометрит определялся как любая внутриутробная инфекция, возникающая после третьего периода родов до 6 недель после родов. На момент постановки диагноза должны присутствовать как минимум 2 из следующих симптомов или признаков [5, 17]:

  1. а)

    Лихорадка (температура в подмышечных впадинах> 37,5 ° C в 2 или более случаях с интервалом не менее 1 часа или температура> 38 ° C в одном случае), возникающая при отсутствии очевидного источника инфекции или альтернативных очагов инфекции.

  2. б)

    Увеличивающаяся потеря лохий или зловонные лохии.

  3. в)

    Боль внизу живота или болезненность надлобка при пальпации.

В качестве альтернативы, в случае наличия только одного из вышеперечисленных симптомов, диагноз эндометрита также можно установить по:

  1. я.

    Положительный результат посева мазка из гениталий в присутствии (а).

  2. II.

    Повышенное общее количество лейкоцитов> 11,0 × 10 9 клеток / л в присутствии (b) или (c).

Женщины, у которых развился эндометрит, лечились в соответствии с протоколом местной больницы по усмотрению лечащего врача.Это включало амбулаторное лечение, госпитализацию для внутривенного введения антибиотиков или хирургическую эвакуацию. Для амоксициллин-клавулановой кислоты дополнительный мониторинг сыворотки крови на трансаминит не был оправдан, поскольку этот риск невелик, и производитель не дает никаких рекомендаций. После начала испытаний изменений в методиках не было. Вся собранная информация была преобразована в предварительно протестированную проформу соответствующими координаторами сайта. Единственная бумажная копия хранилась в специально отведенном запертом отсеке на сайте набора персонала, была доступна только координатору сайта и скомпилирована в электронном формате в конце периода наблюдения.Электронная копия была лишена идентификаторов пациентов. После того, как информация в электронной копии была сочтена полной и перепроверена координаторами с другого сайта, бумажная копия была уничтожена, как было согласовано в процессе этического утверждения.

Мы разработали это испытание, чтобы установить 5-кратное снижение заболеваемости эндометритом с 5% в интервенционной группе (без профилактики) до 1% в контрольной группе (профилактика продолжалась согласно протоколу). Исходная частота эндометрита и снижение частоты осложнений при профилактике оценивались на основе существующих исследований [4, 15, 18].Мощность испытания (1-бета) была установлена ​​на уровне 0,85 с уровнем значимости (альфа) 0,05. Размер выборки рассчитывался с использованием программного обеспечения PS версии 3.0.12 [19].

Потребовалось бы триста двадцать пять женщин на каждой руке, чтобы отвергнуть нулевую гипотезу о том, что антибиотикопрофилактика привела к пятикратному снижению послеродового эндометрита после родов через естественные родовые пути у женщин с рваными оболочками плаценты.

Анализ выполняли с использованием SPSS 21.0 ™ (IBM). Описательный анализ будет проводиться на демографических данных пациента.Рассчитывалась частота первичных исходов (послеродовой эндометрит), вторичных исходов (госпитализация в ОИТ, хирургическая эвакуация продуктов зачатия и переливание крови). Категориальные данные анализировали с использованием критерия хи-квадрат, а непрерывные данные — с помощью независимого Т-критерия. Непрерывные переменные, которые не были нормально распределены, такие как продолжительность второй стадии, были проанализированы с использованием критерия Манна-Уитни. Анализ проводился по намерению лечить.

Утверждение Комитета по медицинским исследованиям и этике (MREC) Министерства здравоохранения Малайзии было получено до начала исследования (идентификационный номер ЯМР 16–1016-31 034).Исследование было ретроспективно зарегистрировано на сайте ClinicalTrials.gov (NCT 03459599).>

Исцеление преждевременно разорванных плодных мембран

Доклиническая модель стерильной разорванной мембраны на мышах

Модель стерильного разрыва плодных оболочек на мышах была создана с использованием пункции плодных оболочек. амниотическая мембрана с иглами 26 или 20 G (внешний диаметр 0,47 или 0,91 мм) на 15-й эмбриональный день (ED). При пункции околоплодные воды вытекли через миометрий (рис. 1А) и во влагалище через шейку матки (рис.1Б). После удаления миометрия был хорошо виден разорванный край хориодецидуальной оболочки (рис. 1C, D), и была измерена длинная ось разрыва. Край амниона обычно окрашивался черными чернилами (рис. 1С), что отличало его от хориодецидуа. Также измеряли длинную ось разрыва амниона (рис. 1D). В случаях, когда разрыв амниона был неясным, хориодецидуальную ткань осторожно скользили ватным тампоном, чтобы прояснить край разорванного амниона. Если амнион зажил полностью, пятно амниона выглядело как точка (рис.1E). Через два часа после разрыва перфорации были видны макроскопически (рис. 2А, 2 часа). Через 24 часа почти половина повреждений все еще была видна, но диаметр перфорации значительно уменьшился. Разрыв закрылся через 48 и 72 ч (рис. 2А). Гистологический анализ места разрыва в поперечном сечении показал, что структура мембраны была прервана через 2 часа после разрыва (рис. 2B, 2 часа). Через 24 часа толщина амниона увеличилась на краю повреждения (рис. 2B, 24 часа). В нашей модели 26 G-индуцированных перфораций амниона были практически закрыты монослоем эпителиальных клеток, покрывающих многослойные мезенхимные клетки в течение 48–72 часов (рис.2Б, 24–72 ч).

Рисунок 1

Мышиная модель стерильной разорванной мембраны с иглой 26 размера (ø 0,47 мм). Утечка околоплодных вод после прокола через плодную оболочку ( A ) во влагалище через шейку матки ( B ). ( C ) Разрыв плодной оболочки через 24 часа после разрыва иглой 20 ga. Миометрий удален для визуализации дефектов мембраны. Обратите внимание, что край разорванного амниона был залит черными чернилами. ( D ) Схема панели C, иллюстрирующая дефекты хориодецидуала и амниона.( E ) Амнион и хориодецидуальная оболочка полностью зажили через 72 часа после разрыва иглой 26 ga.

Рисунок 2

Доклиническая модель стерильных разорванных мембран на мышах. ( A F ) Время заживления амниона. ( A ) Макроскопические изображения разрыва плодных оболочек с помощью иглы 26 G. Место разрыва окрашивали тушью, образуя черное пятно в центре кругов, обведенных желтым. ( B ) Окрашивание разорванных плодных оболочек гематоксилином-эозином (H&E) иглой 26 G (x 400).Весь гестационный мешок, включая миометрий, оболочки плода и плод, был зафиксирован и разрезан на место повреждения. Am , амнион; Чо , хорион; Dec , decidua; CD , choriodecidua; Myo , миометрий. Красная стрелка указывает на дефект амниона, а черная стрелка указывает на заживший участок. Обратите внимание, что место разрыва было окрашено черными индийскими чернилами. Прутки, 50 мкм. ( C ) Изображения сканирующей электронной микроскопии (SEM). После удаления плода и плаценты изображения плодных оболочек были получены изнутри гестационного мешка.Следовательно, показанная здесь поверхность представляет собой эпителиальный слой амниона. Прутки, 20 мкм. ( D E ) Стерильная разорванная мембрана с иглой 20 калибра (ø 0,91 мм). ( D ) Макроскопические изображения разрыва плодных оболочек в указанное время после разрыва 20 G. Желтые пунктирные линии обводят участки разрыва, окрашенные черными чернилами India. Желтые пунктирные линии обводят открытые колотые раны (не зажившие), а стрелкой обозначены закрытые участки заживления. ( E ) Окрашивание плодных оболочек H&E после разрыва 20 G в указанное время.Прутки, 50 мкм. ( F ) Иммунофлуоресцентное окрашивание на виментин (зеленый), E-кадгерин (красный) и DAPI (синий) плодных оболочек с интактного участка на эмбриональном d15 ( Intact ) или края заживающего амниона через 24 часа после разрыва 20 G ( Разорванный ). Амнион обведен белыми пунктирными линиями. Прутки, 50 мкм. ( G ) Иммунолокализация HSP70 (красный) и Ki67 (зеленый) в интактных (неразорванных) и заживающих разорванных мембранах через 24 часа после пункции 20 G. Обратите внимание на близость утолщенного амниона к коже плода по сравнению с неповрежденной неповрежденной мембраной.Пруток, 100 мкм.

Сканирующая электронная микроскопия (СЭМ) была использована для уточнения ультраструктуры заживляющих плодных оболочек. Изображения были взяты изнутри гестационного мешка, так что изображения отражают внутреннюю поверхность амниона, выстилающего гестационный мешок. Интересно, что коллапсирующие перфорации с хирургически точными краями легко наблюдались через 2 часа после разрыва (рис. 2C, 2 часа). Через 24 часа в месте разрыва была отмечена миграция клеток амниона и отложение матрикса, образуя структуру, похожую на пробку или лоскут (рис.2С, 24 ч). Через 48 и 72 часа место разрыва закрылось утолщением и выпуклостью, предположительно отражая миграцию мезенхимальных клеток и отложение матрикса, как видно с помощью световой микроскопии (рис. 2C, 48 часов и 72 часа). Кроме того, место разрыва, по-видимому, было покрыто эпителиальными клетками амниона (рис. 2C, 48 и 72 часа, изображения с более высоким разрешением показаны на рис. S1A, B).

Затем мы сравнили быстрое полное закрытие проколов 26 G с более крупными разрывами 20 G (внешний диаметр 0,91 мм). В отличие от практически 100% -ного заживления небольших разрывов, почти половина участков разрывов 20 G оставалась открытой даже через 72 часа (рис.2D). Гистологический анализ участков разрыва выявил накопление мезенхимальных клеток амниона (рис. 2E, 48 часов и 72 часа). СЭМ-изображения модели большого разрыва были невозможны из-за прилипания разорванной мембраны к плоду из-за серьезной потери околоплодных вод. Таким образом, после фиксации перепонка оказалась хрупкой и разрушилась при извлечении плода из гестационного мешка. Для изучения динамики заживления участков разрыва 20 G были проведены иммунофлуоресцентные исследования с маркерами эпителия и мезенхимы.В интактных плодных мембранах маркер эпителиальных клеток E-cadherin преимущественно локализуется в межклеточных соединениях эпителиальных клеток амниона и хориона (Fig. 2F). Окрашивание было сильно локализовано и организовано через равные промежутки времени между уплощенными эпителиальными клетками. Виментин-положительные мезенхимные клетки амниона были локализованы в 1-2 клеточных слоях под эпителиальной выстилкой (рис. 2F, интактные), и фибробласты в хорионе также были виментин-положительными (рис. 2F, интактные). В поврежденном эпителии окрашивание E-кадгерином диффузно локализовалось по всей клеточной мембране в течение 24 часов (рис.2F, с разрывом). Виментин-положительные мезенхимальные клетки амниона выступали в месте разрыва, что приводило к утолщению края заживляющего амниона (рис. 2F, разрыв).

Чтобы определить, является ли этот утолщенный край заживляющего амниона следствием пролиферации, иммуноокрашивание Ki67 было колокализовано с HSP70, чтобы гарантировать правильную локализацию места повреждения (рис. 2G). В неповрежденных мембранах HSP70 был пунктированным и редко распределенным. В разорванной мембране через 24 часа HSP70 был более интенсивным и широко распределялся по утолщенному амниону, который находится ближе к коже плода из-за потери околоплодных вод (рис.2F). Интересно, что Ki67 не был увеличен в поврежденном амнионе по сравнению с интактными мембранами и меньше, чем устойчивое окрашивание Ki67, наблюдаемое в пролиферирующей коже плода (Fig. 2G).

Средний диаметр небольших разрывов составил 0,12 мм через 24 часа и 0,03 мм через 72 часа, тогда как при больших разрывах диаметр 1,25 мм через 24 часа (значительно увеличился по сравнению с небольшим разрывом через 24 часа) уменьшился до 0,82 мм через 72 часа. ( P <0,01 по сравнению с небольшим разрывом через 72 часа) (рис. 3A). В модели малого разрыва среднее полное закрытие амниона составило 83% через 24 часа и 98% через 72 часа (рис.3Б). Однако в модели большого разрыва частота закрытия составила всего 7% через 24 часа и 48% через 72 часа (рис. 3B). При хориодецидуе средний диаметр небольшого разрыва составил 0,31 мм через 24 часа и 0,24 мм через 72 часа (статистически не значимо), тогда как при большом разрыве заживление было заметно замедленным: 1,38 мм через 24 часа ( P <0,01 по сравнению с небольшой разрыв) и 1,29 мм через 72 часа ( P <0,01 по сравнению с небольшим разрывом, рис. S2A). Закрытие хориодецидуальной оболочки было значительно нарушено по сравнению с амнионом на 61% и 78% через 24 и 72 часа соответственно в модели небольшого разрыва (рис.S2B). В модели большого разрыва хориодецидуальная оболочка не заживала через 24 часа (без закрытия) и только 16% через 72 часа (рис. S2B).

Рисунок 3

Скорость заживления и диаметры перфорации амниона после прокола мембраны. ( A ) Диаметр участков разрыва мембраны в амнионе с помощью иглы 26 G (ø 0,47 мм) или 20 G (ø 0,91 мм) через 24 и 72 часа пункции. Каждый символ представляет один разрыв. Синяя полоса указывает среднее значение и SEM. ** P <0,01, ANOVA. ( B ) Процент полного закрытия разорванного амниона через 24 и 72 часа.Количество полностью закрытых разрывов / полных разрывов показано в виде столбца. * P <0,05, * P <0,01, χ 2 . n = 41–64 пункции из 12–17 плодных оболочек 3–7 беременных мышей в каждой группе. ( C ) Объем околоплодных вод после разрыва с помощью иглы 26 G (ø 0,47 мм) или 20 G (ø 0,91 мм). ЭД, эмбриональный день. Значения сравнивали с объемом неповрежденного гестационного мешка в каждый момент времени. Планки погрешностей представляют SEM. n = 6–20 гестационных мешков от 3–7 беременных мышей в каждой группе.* P <0,05, ** P <0,01.

Во время пункции значительное количество околоплодных вод вытекло из гестационного мешка с увеличенными потерями в модели большого разрыва (рис. 3C). Интересно, что хотя колотые раны закрылись в группе с небольшим разрывом, объем околоплодных вод не восстановился через 48 и 72 часа. Несмотря на значительное уменьшение амниотической жидкости, выживаемость внутриутробного плода не снизилась после небольшого разрыва (> 86%), но несколько снизилась из-за большого разрыва через 72 часа (со 100 до 82%, P <0.05, χ 2 ). Эта увеличенная потеря плода, по-видимому, была пролапсом пуповины через место разрыва. Большинство плодов выглядели здоровыми с нормальным ростом плода, несмотря на олигогидрамнион (масса плода: 1,06 г в интактном состоянии, 1,00 г в диаметре 0,47 мм и 1,01 г в диаметре 0,91 мм, n = 4–6 в каждой группе). Кроме того, маркеры дифференцировки альвеолярного эпителия легких были сходными в легком плода из интактных и разорванных мембран на d18,5 (дополнительная таблица 2).

Уникальные профили экспрессии генов заживления ран в поврежденном амнионе

Классически заживление ран у взрослых состоит из четырех этапов: (1) гемостаз, (2) воспаление, (3) пролиферация и (4) ремоделирование 6,7, 14 .Поврежденные сосуды играют важную роль в этом процессе из-за раннего процесса образования сгустка, рекрутирования иммунных клеток и высвобождения факторов роста из неоангиогенеза. Уникальная природа бессосудистого амниона, состоящего из фетальных клеток, предполагает, что основные механизмы заживления ран должны различаться в плодных оболочках. Чтобы исследовать эти механизмы, профили экспрессии генов, связанные с заживлением ран, были количественно определены в плодных оболочках с повреждением или без него (рис. 4). Используя плодные мембраны in vivo (образцы, которые включают амнион, хорион, децидуальную оболочку и все клетки, прикрепленные к мембране), уровни мРНК провоспалительных цитокинов, интерлейкин-1β ( Il1b ), фактор некроза опухоли f ( T ), а Il6 увеличилось в течение 2 часов после небольшой пункции, вернувшись к нормальным уровням через 24 часа.Напротив, после большого разрыва относительно высокие уровни мРНК Il1b , Tnf и Il6 сохранялись до 72 часов. Интересно, что противовоспалительный цитокин, Il10 , также заметно повышается в разорванных мембранах, особенно после большого разрыва (60-кратный по сравнению с 8-кратным для Tnf , рис. 4).

Рисунок 4

Разрыв плодных оболочек изменяет экспрессию воспалительного гена in vivo . Экспрессия Il1b , Tnf , Il6 и Il10 в неповрежденном или разорванном виде (ø 0.47 мм: игла 26 G с 8 проколами на мешок и ø 0,91 мм: игла 20 G с 4 проколами на мешок плодных оболочек. Относительную экспрессию мРНК каждого гена, нормированную на уровень β 2 микроглобулина, сравнивали с уровнями интактной мембраны через 2 часа. Для статистического анализа экспрессию гена в разорванной мембране сравнивали с экспрессией интактной мембраны в каждый момент времени. Планки погрешностей представляют SEM. n = 5–6 плодных оболочек от 5–6 беременных мышей в каждой группе. * P <0,05, ** P <0.01.

Факторы роста играют важную роль в заживлении ран многих тканей взрослого человека. Однако при заживлении плодных оболочек уровни мРНК этих факторов роста (эпидермальный фактор роста, Egf ; основной фактор роста фибробластов, Bfgf) или Fgf2 ; трансформирующие факторы роста, Tgfb1 и и 3; фактор роста эндотелия сосудов, Vegf ; и инсулиноподобные факторы роста, Igf1, и 2) не были индуцированы стерильным разрывом (за исключением небольшого увеличения Tgfb2 после большого разрыва) (рис.S3). Поскольку эти факторы роста в значительной степени участвуют в ангиогенезе, разумно, что они не регулируются в бессосудистом амнионе. Даже TGF-β2 не стимулировал миграцию эпителиальных или мезенхимальных клеток амниона (данные не показаны). В целом результаты показывают, что амнион не заживает с помощью тех же механизмов, что и другие васкуляризированные ткани.

Коллагеновая матрица реконструируется на более поздних этапах заживления ран. Следовательно, образование коллагена в месте заживления сравнивали с использованием окрашивания трихромом через 72 часа и количественной ПЦР мРНК коллагена после разрыва 26 или 20 G.После разрыва 26 G волокна коллагена стали тонкими, образуя рыхлую поддерживающую сеть из зажившего амниона (рис. 5A), и уровни мРНК коллагена 1, 3 и 5 типов не были увеличены (рис. 5C). Напротив, отложение коллагена было плотным с большими отложениями в утолщенном месте заживления после разрыва 20 G (рис. 5B). Кроме того, мРНК коллагена 1 и 3 типа увеличивалась через 72 часа (фиг. 5C). MMP9 мРНК также была активирована через 24 часа в большом разрыве (фиг. 5C). В совокупности активный синтез коллагена и ремоделирование матрикса происходили в заживающей мембране после большого разрыва.Отсутствие повышенного Ki67 на участке раны вместе с виментин-положительными клетками в утолщенном крае предполагает, что заживление раны происходит из-за миграции, EMT и отложения матрикса.

Рисунок 5

Отложение коллагена в плодных оболочках после небольшого или большого разрыва. Окрашивание разрыва плодной оболочки трихромом через 72 часа после пункции иглой 26 G ( A ) или 20 G ( B ). Амнион обозначен зелеными пунктирными линиями. Пруток, 50 мкм. (C) Экспрессия Col1a1, Col3a1, Col5a1, Mmp2 и Mmp9 в неповрежденном или разорванном виде (ø 0.47 мм: игла 26 G с 8 проколами на мешок и ø 0,91 мм: игла 20 G с 4 проколами на мешок плодных оболочек. Относительную экспрессию мРНК каждого гена, нормированную на уровень β 2 микроглобулина, сравнивали с уровнями интактной мембраны через 2 часа. Для статистического анализа экспрессию гена в разорванной мембране сравнивали с экспрессией интактной мембраны в каждый момент времени. Планки погрешностей представляют SEM. n = 5–6 плодных оболочек от 5–6 беременных мышей в каждой группе. * P <0,05, ** P <0.01.

Рекрутмент макрофагов околоплодных вод в разорванный амнион

Врожденный иммунитет способствует заживлению ран, и макрофаги играют центральную роль 10 . Чтобы исследовать участие макрофагов в заживлении разорванной оболочки плода, иммуноокрашивание макрофагов было проведено в месте заживления как небольшого (рис. S4B, I), так и большого разорванного амниона через 24 часа после травмы (рис. 6B и S4I). Использовали два маркера макрофагов (F4 / 80 и CD68), что указывало на аналогичные результаты в отношении количества и местоположения макрофагов.В интактном амнионе до разрыва макрофаги практически отсутствовали (рис. 6A, S4A, I). Напротив, макрофаги локализованы в амнионе через 24 часа после травмы (рис. 6B и S4B) с редкими макрофагами в хорионе и децидуальной оболочке (рис. 6C). В отличие от других тканей, в которых нейтрофилы рекрутируются на ранней стадии заживления ран, нейтрофилы редко встречаются в заживляющем амнионе (рис. S4C, D).

Рисунок 6

Макрофаги и молекулы адгезии в месте разрыва. ( A C ) Иммуноокрашивание на F4 / 80 (зеленый) и DAPI (синий) мембраны через 24 часа после разрыва иглой 20 G.Пунктирными линиями обозначены амнион ( Am , белый), поверхность кожи плода (желтый), хорион ( Cho , голубой) и децидуальная оболочка ( Dec , фиолетовый). Myo , миометрий. ( A ) Интактная плодная оболочка. ( B ) Макрофаги в заживляющем амнионе (стрелки). ( C ) Разрыв края хорио-децидуальной оболочки. Прутки, 50 мкм. ( D F ) Окрашивание разрывов мембран H&E. ( D ) Макрофаг околоплодных вод (стрелка) прикрепляется к разрыву амниона через 2 часа (стрелка).( E и увеличенное изображение в F ) Макрофаги околоплодных вод (зеленые) прикрепляются к поверхности амниона через 24 часа, и мезенхимальные клетки мигрируют (острие стрелки). Обратите внимание на мезенхимальное изменение формы эпителиальных клеток в F . Прутки, 50 мкм. ( G и H ) Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) Y-хромосомы (красный) и иммуноокрашивание на F4 / 80 (зеленый) при заживлении амниона ( G ) и интактного миометрия ( H ) при 48 ч. Прутки, 10 мкм.( I L ) Молекулы адгезии макрофагов на месте разрыва. Иммуноокрашивание на F4 / 80 (зеленый), VCAM1 ( I ) или P-селектин ( J , красный) и DAPI (синий) при разрыве амниона через 24 часа после разрыва иглой 20 G. Прутки, 50 мкм. ( K и L ) Экспрессия гена VCAM1 ( K ) или P-селектина ( L ) интактной или разорванной плодной мембраны с помощью иглы 20 G в указанное время. Планки погрешностей представляют SEM.n = 5–6 плодных оболочек от 5–6 беременных мышей в каждой группе. * P <0,05, ** P <0,01.

Затем мы попытались определить происхождение макрофагов, попавших в место повреждения. Макрофаги прикрепляются к разорванному амниону уже через 2 часа (рис. 6D) и прочно прикрепляются к разорванному участку в течение 24 часов (рис. 6E – F и 7C), при этом некоторые из них включаются в амнион (рис. 6B, 7 и S4). . Примечательно, что прикрепление макрофагов было ограничено стороной плода (рис.6D – F). В плодных оболочках, полученных от плода мужского пола, макрофаги, включенные в заживляющий амнион, были положительными по Y-хромосоме с использованием флуоресцентной гибридизации in situ (FISH, рис. 6G), что подтверждает, что эти макрофаги были плодного происхождения. Напротив, макрофаги в миометрии были отрицательными по Y-хромосоме (материнское происхождение, рис. 6H).

Фиг. 7

Локальная секреция цитокинов макрофагами М-2. ( A C ) Иммунофлуоресцентное окрашивание мембраны плода на F4 / 80 (зеленый) или CD68 (зеленый), NO-синтазу-2 (NOS2, красный в A ), аргиназу-1 (Arg1, красный в ) B ) и DAPI (синий) через 24 часа разрыва иглой 20 G (ø 0.91 мм). Пунктирными линиями обозначены амнион (белый), поверхность кожи плода (желтый), хорион (голубой) и децидуальная оболочка (фиолетовый). Обратите внимание, что Arg1 экспрессировался как в макрофагах ( B и C , стрелка), так и в эпителиальных клетках амниона ( B и C , стрелка). Рисунок 7C находится в том же месте, что и фиг. 6E и F. Штанги, 50 мкм. ( D I ) Иммунофлуоресцентное окрашивание мембраны плода на F4 / 80 (зеленый), TNF (красный в D F ), IL-1β (красный в G I ) и DAPI (синий) иглой 20 G (ø 0.91 мм). ( E и F ) TNF на участке заживления амниона в макрофагах (стрелка) и эпителиальных клетках амниона (стрелка) через 6 часов после разрыва. ( D ) Интактная плодная оболочка через 6 часов. ( H и I ) IL-1β при заживлении амниона в макрофаге (стрелка) через 24 часа после разрыва. ( G ) Интактная плодная оболочка через 24 часа. Прутки, 50 мкм. ( J ) Количественное определение CD68-положительных клеток в околоплодных водах каждого гестационного мешка. Синяя полоса указывает среднее значение и SEM.n = 4–9 из 2–5 беременных мышей в каждой группе. ** P <0,01, ANOVA.

Молекулы адгезии (например, молекула внутриклеточной адгезии 1 (ICAM1), молекула адгезии сосудистых клеток 1 (VCAM1), E- и P-селектин) экспрессируются на поверхности воспаленных участков, к которым прикрепляются макрофаги 15 . Хотя иммуноокрашивание VCAM1 и P-селектина отсутствовало в интактном амнионе (рис. S5B, E), оба были локализованы в местах повреждения амниона как в малых (рис. S5A, D), так и в больших (рис.6I, J) разорванные участки. Макрофаги прикрепились к амниону, экспрессирующему Р-селектин, в течение 24 часов (фиг. 6J, стрелка). Сходным образом мРНК VCAM1 и P-selectin увеличивались уже через 2 часа после как малых, так и больших разрывов (фиг. 6K – L и S5C, F). В целом данные предполагают, что поврежденные эпителиальные клетки экспрессируют молекулы адгезии в ответ на повреждение, вероятно, прикрепляя рекрутированные амниотические макрофаги для заживления. Подобно паттерну экспрессии цитокинов (фиг.4), повышенные уровни мРНК VCAM1 и P-селектина сохранялись после разрыва 20 G (фиг.6K, L), предполагая, что рекрутирование макрофагов продолжалось до полного заживления амниона. E-selectin мРНК также увеличивалась в разорванной плодной мембране через 2 часа, но экспрессия гена ICAM1 не регулировалась (данные не показаны).

Затем репрезентативные маркеры макрофагов M1-фенотипа (NO-синтаза-2, NOS2) и макрофагов M2 (аргиназа 1, Arg1) были использованы для характеристики фенотипа макрофагов в поврежденном амнионе 8 . В участке заживления эти макрофаги были NOS2-отрицательными (рис.7A), даже если миометрий положительно окрашен NOS2 (рис. S4G). Напротив, Arg1-положительные M2-макрофаги наблюдались в месте заживления амниона (рис. 7B, C). Таким образом, макрофаги в разорванном амнионе были M2-доминантными, фенотипом заживления ран, хотя фенотип может быть смешанным на ранних этапах, в которых провоспалительные цитокины были локализованы в повреждении. Неожиданно мы также обнаружили сильное окрашивание Arg1 в эпителиальных клетках амниона (рис. 7B, C).

В интактном амнионе TNF и IL-1β не наблюдались (рис.7D, G). В месте разрыва TNF экспрессировался в макрофагах и эпителиальных клетках амниона (фиг. 7E). Точно так же IL-1β экспрессировался в макрофагах (фиг. 7H, I и S7F). IL-1β также экспрессировался в интактной децидуальной оболочке (фиг. 7G). Примечательно, что секреция этих цитокинов была локализована в месте разрыва амниона. Интересно, что количество CD68-положительных макрофагов на объем околоплодных вод значительно увеличивалось из-за разрыва мембран в течение 6 часов (рис. 7J). Через 24–72 часа повышенная плотность макрофагов в околоплодных водах имеет тенденцию возвращаться к базальному уровню, что позволяет предположить, что плавающие макрофаги в околоплодных водах прикрепляются и включаются в раненый амнион в течение 24 часов.Вместе высвобождение цитокинов сильно локализовано в месте заживления амниона макрофагами и отзывчивыми эпителиальными клетками.

Эпителиально-мезенхимальный переход (EMT) с помощью IL-1β и TNF

Эпителиально-мезенхимальный переход (EMT) — это биологический процесс, который изменяет фенотип эпителиальных клеток на фенотип мезенхимальных клеток. Поскольку EMT значительно усиливает миграцию клеток и восстановление тканей, мы исследовали возможность того, что EMT может участвовать в заживлении поврежденного амниона.Виментин-положительные или двойные положительные по E-кадгерин-виментину клетки были разбросаны в слое эпителиальных клеток поврежденного амниона в течение 6 часов (рис. 8A и S6F). Эти виментин-положительные клетки также наблюдались через 24 часа (фиг. 8B, C и S6F). Открытие того, что эпителиальные слои четко отделены от скопления слоя мезенхимальных клеток в месте заживления амниона, предполагает возможность EMT in vivo .

Фиг. 8

Эпителиально-мезенхимальный переход (EMT) в мышином pPROM и эпителиальных клетках амниона человека.( A C ) Иммуноокрашивание на виментин (зеленый), E-кадгерин (красный) и DAPI (синий) на месте разрыва амниона иглой 20 G (ø 0,91 мм). Разрыв амниона через 6 часов ( A , 26 G) и 24 часа ( B и C , 20 G ) . ( C ) — увеличенное изображение ( B ). Обратите внимание, что виментин-положительные клетки наблюдались в эпителиальном слое амниона (стрелка). Прутки, 20 мкм. ( D и E ) Анализ царапин на заживление ран первичных эпителиальных клеток амниона человека.Клетки обрабатывали контрольным носителем, IL-1β (1 нг / мл) или TNF (10 нг / мл) после расчесывания. Фазово-контрастные или иммуноокрашенные изображения с виментином (зеленый), E-кадгерином (красный) или DAPI (синий) получали через 0 или 72 часа. Зеленая стрелка указывает на клетки мезенхимальной формы в раненой области эпителиальных клеток. Прутки, 200 мкм. ( E ) Процент закрытия поцарапанных эпителиальных и мезенхимальных клеток амниона человека, обработанных разными дозами IL-1β (верхняя панель) или TNF (нижняя панель). Планки погрешностей представляют стандартное отклонение.n = 3 в каждой группе. * P <0,05, ** P <0,01, по сравнению с контролем (0 нг / мл) в каждый момент времени.

Провоспалительные цитокины потенциально могут вызывать ЕМП при заживлении кожи 16 . Таким образом, мы проверили, индуцируют ли IL-1β или TNF ЕМП в первичных эпителиальных клетках амниона человека. В анализах царапин на заживление ран эпителиальных клеток амниона миграция увеличивалась дозозависимо с помощью IL-1β или TNF (фиг. 8D, E). Напротив, IL-1β или TNF не стимулировали миграцию мезенхимальных клеток (рис.8E). Считается, что закрытие царапины стимулируется миграцией, а не пролиферацией эпителиальных клеток, поскольку IL-1β или TNF не изменяют количество жизнеспособных клеток в анализе пролиферации эпителиальных клеток амниона (данные не показаны). Кроме того, IL-6 не стимулировал миграцию эпителиальных или мезенхимальных клеток амниона (данные не показаны). В поцарапанной области IL-1β или TNF изменяли морфологию эпителиальных клеток амниона на веретенообразные клетки (фиг. 8D, зеленые стрелки во втором столбце).Иммунофлуоресценция показала, что эти веретенообразные клетки были виментин-положительными (фиг. 8D, 3-й столбец), что указывает на EMT, и виментин-положительные клетки также были разбросаны в неповрежденной области (фиг. 8D, 3-й столбец). Виментин-положительные клетки не наблюдались в контрольных клетках без повреждений. IL-1β и TNF также изменили морфологию эпителиальных клеток на веретенообразную (рис. 8D, 2-й столбец). Большинство этих клеток сохраняли эпителиальный фенотип (т.е. положительный по E-кадгерину и отрицательный по виментин) (рис.8D, 3-й и 4-й столбцы), несмотря на изменение формы эпителиальных клеток. Продолжение культивирования на 5 дней привело к появлению виментин-положительных клеток в поцарапанной области первичных эпителиальных клеток амниона человека даже без обработки цитокинами (рис. S6C). Экспрессия гена продемонстрировала, что мРНК виментина была значительно увеличена в поцарапанных клетках по сравнению с контрольными клетками без повреждения, тогда как мРНК E-кадгерина не изменилась (фиг. S6D). Более того, культура с 10% FBS в течение 8 дней резко увеличивала ЭМП эпителиальных клеток амниона (рис.S6A, B). Поскольку FBS включает различные цитокины и факторы роста, мы предполагаем, что эпителиальные клетки амниона легко подвергаются ЭМП после стимуляции этими факторами. Скорость миграции эпителиальных клеток ниже, чем у мезенхимальных клеток (Рис. S5E). Таким образом, EMT увеличивает скорость миграции эпителиальных клеток, ускоряя закрытие разорванного амниона. Некоторые из массивных мезенхимальных клеток, агрегирующих в центре заживления in vivo , могут происходить из цитокин-стимулированных эпителиальных клеток амниона посредством ЭМП.

Бактерии и воспалительные клетки в мембранах плода не всегда вызывают преждевременные роды

  • 1

    Kelly RW 1994 Поддержание беременности и роды: роль простагландина в управлении иммунной и воспалительной реакцией. Endocr Ред. 15 : 684–706

    CAS Статья Google ученый

  • 2

    Kelly RW 1996 Медиаторы воспаления и роды. Ред. Репродукция 1 : 89–96

    CAS Статья Google ученый

  • 3

    Маклин М., Биситс А., Дэвис Дж., Вудс Р., Лоури П., Смит Р. 1995 Плацентарные часы, контролирующие продолжительность беременности человека. Nat Med 1 : 460–463

    CAS Статья Google ученый

  • 4

    Френкель Р.А., Мугурума К., Джонстон Дж.М. 1996 Биохимическая роль фактора активации тромбоцитов в воспроизводстве. Prog Lipid Res 35 : 155–168

    CAS Статья Google ученый

  • 5

    Ruiz RJ 1998 Механизмы доношенных и преждевременных родов: факторы, влияющие на деятельность матки. J Obstet Gynecol Neonatal Nurs 27 : 652–660

    CAS Статья Google ученый

  • 6

    Challis JRG 2000 Механизм родов и преждевременных родов. Obstet Gynecol Surv 55 : 650–660

    Артикул Google ученый

  • 7

    Чаллис Дж. Р., Лай С. Дж., Гибб В., Уиттл В., Патель Ф., Альфаиди Н. 2001 Понимание преждевременных родов. Ann NY Acad Sci 943 : 225–234

    CAS Статья Google ученый

  • 8

    Minkoff H 1983 Недоношенность: инфекция как этиологический фактор. Obstet Gynecol 62 : 137–144

    CAS Google ученый

  • 9

    Hillier SL, Witkin SS, Krohn MA, Watts DH, Kiviat NB, Eschenbach DA 1993 Взаимосвязь цитокинов околоплодных вод и преждевременных родов, инфекции околоплодных вод, гистологического хориоамнионита и инфекции хориоамниона. Obstet Gynaecol 81 : 941–948

    CAS Google ученый

  • 10

    Бениршке К., Кауфманн П. 2000 Патология плаценты человека, 4-е изд. . Springer-Verlag, New York, стр. 591–608

  • 11

    Steinborn A, Gunes H, Roddiger S, Halberstadt E 1996 Повышенное выделение цитокинов из плаценты, процесс, связанный с преждевременными родами в отсутствие внутриутробной инфекции. Obstet Gynecol 88 : 534–539

    CAS Статья Google ученый

  • 12

    Роос П.Дж., Малан А.Ф., Вудс Д.Л., Бота П., Хайланд Дж., Хиз Хеде В. 1980. Бактериологическая среда недоношенных детей. S Afr Med J 57 : 347–350

    CAS Google ученый

  • 13

    Донг И., Сент-Клер П.Дж., Рамзи И., Каган-Халлет К.С., Гиббс Р.С. 1987 Микробиологическое и клиническое исследование воспаления плаценты в срок. Obstet Gynecol 70 : 175–182

    CAS Google ученый

  • 14

    Ромеро Р., Сиртори М., Оярзун Е., Авила С., Мазор М., Каллахан Р., Сабо В., Атанассиадис А. П., Хоббинс Дж. С. 1989 Инфекция и роды.V. Распространенность, микробиология и клиническое значение интраамниотической инфекции у женщин с преждевременными родами и неповрежденными плодными оболочками. Am J Obstet Gynaecol 161 : 817–824

    CAS Статья Google ученый

  • 15

    Льюис Дж. Ф., Джонсон П., Миллер П. 1976 Оценка околоплодных вод на наличие аэробных и анаэробных бактерий. Am J Clin Pathol 65 : 58–63

    CAS Статья Google ученый

  • 16

    Woods DL, Sinclair-Smith CC, Malan AF, Harrison A 1978 г. Инфекция околоплодных вод в срок. S Afr Med J 53 : 137–139

    CAS Google ученый

  • 17

    Гиббс Р.С., Бланко Д.Д., Сент-Клер П.Дж., Кастанеда Ю.С. 1982 Количественная бактериология околоплодных вод у доношенных женщин с клинической интраамниотической инфекцией. J Infect Dis 145 : 1–8

    CAS Статья Google ученый

  • 18

    Ромеро Р., Мазор М., Морротти Р., Авила С., Оярсун Е., Инсунза А., Парра М., Бенке Е., Монтиель Ф, Касселл Г. Х. 1992 Инфекция и роды.VII. Микробная инвазия амниотической полости при самопроизвольном разрыве плодных оболочек в срок. Am J Obstet Gynecol 166 : 129–133

    CAS Статья Google ученый

  • 19

    Oyarzún E, Yamamoto M, Kato S, Gomez R, Lizama L, Moenne A 1998 Специфическое обнаружение 16 микроорганизмов в околоплодных водах с помощью полимеразной цепной реакции и ее корреляция с возникновением преждевременных родов. Am J Obstet Gynecol 179 : 1115–1119

    Артикул Google ученый

  • 20

    Krimmer V, Merkert H, Von Eiff C, Frosch M, Eulert J, Lohr JF, Hacker J, Ziebuhr W. 1999 Обнаружение Staphylococcus aureus и Staphylococcus epidermidis в клинических образцах с помощью 16S рРНК-направленной гибридизации in situ . J Clin Microbiol 37 : 2667–2673

    CAS Google ученый

  • 21

    Brand BC, Amann RI, Steinert M, Grimm D, Hacker J 2000 Идентификация и обнаружение in situ внутриклеточных бактерий в окружающей среде. Subcell Biochem 33 : 601–624

    CAS Статья Google ученый

  • 22

    Licht TR, Krogfelt KA, Cohen PS, Poulsen LK, Urbance J, Molin S 1996 Роль липополисахарида в колонизации кишечника мыши Salmonella typhimurium изучалась с помощью гибридизации in situ . Infect Immun 64 : 3811–3817

    CAS Google ученый

  • 23

    Park CS, Kim J 1999 Быстрое и простое обнаружение Helicobacter pylori с помощью гибридизации in situ . J Korean Med Sci 14 : 15–20

    Google ученый

  • 24

    Schultsz C, Van Den Berg FM, Ten Kate FW, Tytgat GN, Dankert J 1999 Слой кишечной слизи у пациентов с воспалительным заболеванием кишечника содержит большое количество бактерий по сравнению с контрольной группой. Гастроэнтерология 117 : 1089–1097

    CAS Статья Google ученый

  • 25

    Greig PC 1998 Диагностика внутриутробной инфекции у женщин с преждевременным разрывом плодных оболочек (ППРОМ). Clin Obstet Gynecol 41 : 849–863

    CAS Статья Google ученый

  • 26

    Maymon E, Romero R, Pacora P, Gomez R, Mazor M, Edwin S, Chaiworapongsa T, Kim JC, Yoon BH, Menon R, Fortunato S, Berry SM 2001 Роль желатиназы 72 кДа (MMP -2) и его ингибитор (ТИМП-2) при родах у человека, преждевременном разрыве плодных оболочек и интраамниотической инфекции. J Perinat Med 29 : 308–316

    CAS Статья Google ученый

  • 27

    Greisen K, Loeffelholz M, Purohit A, Leong D 1994 Праймеры и зонды для ПЦР для гена 16S рРНК большинства видов патогенных бактерий, включая бактерии, обнаруженные в спинномозговой жидкости. J Clin Microbiol 32 : 335–351

    CAS Google ученый

  • 28

    Hay PE, Morgan DJ, Ison CA, Bhide SA, Romney M, McKenzie P, Pearson J, Lamont RF, Taylor-Robinson D 1994 Продольное исследование бактериального вагиноза во время беременности. Br J Obstet Gynaecol 101 : 1048–1053

    CAS Статья Google ученый

  • 29

    Meis PJ, Goldenberg RL, Mercer B, Moawad A, Das A, McNellis D, Johnson F, Iams JD, Thom E, Andrews WW 1995 Исследование преждевременных прогнозов: значение вагинальных инфекций. Сеть отделений материнско-фетальной медицины Национального института детского здоровья и развития человека. Am J Obstet Gynecol 173 : 1231–1235

    CAS Статья Google ученый

  • 30

    Sobel JD 2000 Бактериальный вагиноз. Annu Rev Med 51 : 349–356

    CAS Статья Google ученый

  • 31

    Evaldson GR, Malmborg AS, Nord CE 1982 Преждевременный разрыв плодных оболочек и восходящая инфекция. Br J Obstet Gynaecol 89 : 793–801

    CAS Статья Google ученый

  • 32

    МакГрегор Дж. А., Френч Дж. И., Паркер Р., Дрейпер Д., Паттерсон Е., Джонс В., Торсгард К., МакФи Дж. 1995 Профилактика преждевременных родов путем скрининга и лечения общих инфекций половых путей: результаты проспективной контролируемой оценки. Am J Obstet Gynecol 173 : 157–167

    CAS Статья Google ученый

  • 33

    Kimberlin DF, Andrews WW 1998 Бактериальный вагиноз: связь с неблагоприятным исходом беременности. Семин Перинатол 22 : 242–250

    CAS Статья Google ученый

  • 34

    Панкуч Г.А., Аппельбаум П.С., Лоренц Р.П., Ботти Дж. Дж., Шахтер Дж., Наей Р.Л. 1984 Микробиология и гистология плаценты и патогенез хориоамнионита. Obstet Gynecol 64 : 802–806

    CAS Google ученый

  • 35

    Zlatnik FJ, Gellhaus TM, Benda JA, Koontz FP, Burmeister LF 1990 Гистологический хориоамнионит, микробная инфекция и недоношенность. Obstet Gynecol 76 : 355–359

    CAS Google ученый

  • 36

    Osman I, Young A, Ledingham MA, Thomson AJ, Jordan F, Greer IA, Norman JE 2003 Плотность лейкоцитов и экспрессия провоспалительных цитокинов в плодных оболочках человека, децидуальной оболочке, шейке матки и миометрии до и во время родов во время родов . Mol Hum Reprod 9 : 41–45

    CAS Статья Google ученый

  • 37

    Винс Г.С., Старки П.М., Джексон М.К., Сарджент И.Л., Редман К.В. 1990 Проточно-цитометрическая характеристика популяций клеток децидуальной оболочки беременности человека и выделение децидуальных макрофагов. J Immunol Methods 132 : 181–189

    CAS Статья Google ученый

  • 38

    Sacks GP, Studena K, Sargent K, Redman CW 1998 Нормальная беременность и преэклампсия вызывают воспалительные изменения в лейкоцитах периферической крови, аналогичные таковым при сепсисе. Am J Obstet Gynecol 179 : 80–86

    CAS Статья Google ученый

  • 39

    Redman CW, Sacks GP, Sargent IL 1999 Преэклампсия: чрезмерная воспалительная реакция матери на беременность. Am J Obstet Gynecol 180 : 499–506

    CAS Статья Google ученый

  • 40

    Mellembakken JR, Aukrust P, Olafsen MK, Ueland T, Hestdal K, Videm V 2002 Активация лейкоцитов во время маточно-плацентарного прохода при преэклампсии. Гипертония 39 : 155–160

    CAS Статья Google ученый

  • 41

    Campbell S, Swann HR, Seif MW, Kimber SJ, Aplin JD 1995 Молекулы клеточной адгезии на ооците и доимплантационном эмбрионе человека. Hum Reprod 10 : 1571–1578

    CAS Статья Google ученый

  • 42

    Берроуз Т.Д., Кинг А., Лок Ю.В. 1994 Экспрессия адгезионных молекул эндоваскулярным трофобластом и децидуальными эндотелиальными клетками: последствия для сосудистой инвазии во время имплантации. Плацента 15 : 21–33

    CAS Статья Google ученый

  • 43

    Proll J, Blaschitz A, Hartmann M, Thalhamer J, Dohr G 1996 Внутриартериальные трофобластные клетки плаценты человека в первом триместре беременности экспрессируют молекулу адгезии нервных клеток. Ранняя беременность 2 : 271–275

    CAS Google ученый

  • 44

    Jarousseau AC, Thibault G, Reverdiau P, Rodriguez AM, Lacord M, de Russe J, Watier H, Degenne D, Lebranchu Y, Gruel Y, Le Bouteiller P, Bardos P 1994 Адгезивные свойства клеток хориокарциномы по отношению к лимфоцитам активируется или нет интерлейкином-2. Cell Immunol 157 : 38–47

    CAS Статья Google ученый

  • 45

    Kimber SJ, Bentley J, Ciemerych M, Moller CJ, Bock E 1994 Экспрессия N-CAM в оплодотворенных пре- и периимплантационных и партеногенетически активированных эмбрионах мыши. Eur J Cell Biol 63 : 102–113

    CAS Google ученый

  • 46

    Blankenship TN, King BF 1996 Внутриартериальный трофобласт макака и вневорсинчатый трофобласт клеточных столбцов и цитотрофобластической оболочки экспрессируют молекулу адгезии нервных клеток (NCAM). Anat Rec 245 : 525–531

    CAS Статья Google ученый

  • 47

    Potgens AJ, Gaus G, Frank HG, Kaufmann P 2001 Характеристика выделений клеток трофобласта с помощью модифицированного анализа проточной цитометрии. Плацента 22 : 251–255

    CAS Статья Google ученый

  • 48

    Кинг А., Балендран Н., Вудинг П., Картер Н. П., Лок Ю. В. 1991 CD3-лейкоциты, присутствующие в матке человека во время ранней плацентации: фенотипическая и морфологическая характеристика популяции CD56 ++. Dev Immunol 1 : 169–190

    CAS Статья Google ученый

  • 49

    Le-Barillec K, Si-Tahar M, Balloy V, Chignard M 1999 Протеолиз моноцитов CD14 эластазой лейкоцитов человека ингибирует активацию клеток, опосредованную липополисахаридами. J Clin Invest 103 : 1039–1046

    CAS Статья Google ученый

  • 50

    Le-Barillec K, Pidard D, Balloy V, Chignard M 2000 Катепсин G нейтрофилов человека подавляет LPS-опосредованную активацию моноцитов посредством протеолиза CD14. J Leukoc Biol 68 : 209–215

    CAS Google ученый

  • 51

    Мацубара С., Ямада Т., Минаками Х., Ватанабе Т., Такидзава Т., Сато I 1999 Полиморфно-ядерные лейкоциты в плодных оболочках активируются у пациентов с преждевременными родами: ультраструктурные и ферментно-гистохимические данные. Плацента 20 : 185–188

    CAS Статья Google ученый

  • Структура и классификация плаценты


    Плаценты всех плацентарных (плацентарных) млекопитающих обладают общими структурными и функциональными особенностями, но есть разительные различия между видами в крупном и микроскопическом строении плаценты.Две характеристики особенно расходятся и составляют основу классификации типов плаценты:

    1. Макро форма плаценты и распределение мест контакта между плодными оболочками и эндометрием.
    2. Число слоев ткани между сосудистой системой матери и плода.

    Различия в этих двух свойствах позволяют классифицировать плаценты на несколько основных типов.

    Классификация на основе формы плаценты и точек контакта

    Исследование плаценты разных видов выявляет поразительные различия в их форме и площади соприкосновения тканей плода и матери:

    • Диффузный : Почти вся поверхность аллантохориона участвует в формировании плаценты.Встречается у лошадей и свиней.
    • Семядоли : Множественные дискретные области прикрепления, называемые семядолями, образуются в результате взаимодействия участков аллантохориона с эндометрием. Фетальные части плаценты этого типа называются семядолями, участки контакта с матерью (карункулы), а комплекс семядолей-карункул — плацентом. Этот вид плацентации наблюдается у жвачных животных.
    • Зональный : Плацента представляет собой полный или неполный пояс ткани, окружающей плод.Встречается у хищников, таких как собаки и кошки, тюлени, медведи и слоны.
    • Дискоидный : образуется единственная плацента дискообразной формы. Встречается у приматов и грызунов.

    Классификация на основе слоев между кровью плода и материнской кровью

    Непосредственно перед формированием плаценты имеется в общей сложности шесть слоев ткани, разделяющих кровь матери и плода. В хориоаллантоидной плаценте всех млекопитающих есть три слоя внеэмбриональных оболочек плода, все из которых являются компонентами зрелой плаценты:

    1. Эндотелий, выстилающий аллантоисные капилляры
    2. Соединительная ткань в виде хориоаллантоисной мезодермы
    3. Хорионический эпителий, самый внешний слой плодных оболочек, полученный из трофобласта

    На материнской стороне также есть три слоя, но количество этих слоев, которые сохраняются, т. Е. Не разрушаются в процессе плацентации, сильно различается у разных видов.Три потенциальных материнских слоя в плаценте:

    1. Эндотелий, выстилающий кровеносные сосуды эндометрия
    2. Соединительная ткань эндометрия
    3. Клетки эпителия эндометрия

    Одна классификационная схема для плаценты основана на том, какие материнские слои остаются в плаценте, что, конечно, то же самое, что и указание, какая материнская ткань контактирует с хорионическим эпителием плода. Каждая из возможностей наблюдается у некоторой группы млекопитающих.

    Специальный выпуск: Амниотическая жидкость и плацентарные мембраны как источники стволовых клеток: достижения и проблемы

    Уважаемые коллеги,

    Значительные последние достижения в регенеративной терапии активизировали исследования различных источников стволовых клеток.

    Хотя эмбриональные и взрослые ткани могут быть использованы для выделения плюрипотентных стволовых клеток, значительные ограничения, в том числе этические соображения, сложность выделения / культивирования и канцерогенность, препятствуют внедрению лабораторных данных в клиническую практику.

    Исследование стволовых клеток привлекло внимание к амниотической мембране и стволовым клеткам околоплодных вод, поскольку эти источники обладают многими преимуществами: во-первых, клетки можно извлечь из выброшенного фетального материала, во-вторых, можно получить стволовые клетки в большом количестве и, наконец, эти источники стволовых клеток являются свободный от этических соображений и канцерогенности. Стволовые клетки, полученные из околоплодных вод и мембран, обладают способностью к дифференцировке, подобной эмбриональным стволовым клеткам, и, подобно мезенхимальным стволовым клеткам, также способны модулировать местный иммунный ответ.Их пониженная иммуногенность и иммуномодулирующие свойства позволяют использовать их в условиях алло- и ксено-трансплантации. Эти и другие свойства делают эти клетки привлекательными для клеточной терапии.

    В этом специальном выпуске «Амниотическая жидкость и плацентарные мембраны как источники стволовых клеток: прогресс и проблемы» приветствуются оригинальные исследовательские статьи, которые иллюстрируют и стимулируют растущие усилия по пониманию роли стволовых клеток в патологических состояниях, таких как сердечно-сосудистые и метаболические заболевания, воспалительные процессы. , аутоиммунные, скелетные и дегенеративные заболевания.

    Д-р Туллия Маральди
    Проф. Валентина Руссо
    Приглашенные редакторы

    Информация для подачи рукописей

    Рукописи должны быть отправлены онлайн по адресу www.mdpi.com, зарегистрировавшись и войдя на этот сайт. После регистрации щелкните здесь, чтобы перейти к форме отправки. Рукописи можно подавать до указанного срока. Все статьи будут рецензироваться. Принятые статьи будут постоянно публиковаться в журнале (как только они будут приняты) и вместе будут перечислены на веб-сайте специального выпуска.Приглашаются исследовательские статьи, обзорные статьи, а также короткие сообщения. Для запланированных статей название и краткое резюме (около 100 слов) можно отправить в редакцию для объявления на этом сайте.

    Представленные рукописи не должны были публиковаться ранее или рассматриваться для публикации в другом месте (за исключением трудов конференции). Все рукописи тщательно рецензируются в рамках процесса простого слепого рецензирования. Руководство для авторов и другая важная информация для подачи рукописей доступна на странице Инструкции для авторов. International Journal of Molecular Sciences — это международный рецензируемый журнал с открытым доступом, выходящий один раз в месяц, который издается MDPI.

    Пожалуйста, посетите страницу Инструкции для авторов перед отправкой рукописи. Плата за обработку статьи (APC) взимается за публикацию в этом журнал открытого доступа. Подробнее об APC см. Здесь. Представленные документы должны быть хорошо отформатированы и написаны на хорошем английском языке. Авторы могут использовать MDPI Услуги редактирования на английском языке перед публикацией или во время редактирования автора.

    .

    Leave a Reply

    Ваш адрес email не будет опубликован.